[发明专利]一种针对巯基多肽生物样本的前处理方法以及对该生物样本的检测方法

摘要

本发明公开了一种针对巯基多肽生物样本的前处理方法。该方法包括将巯基多肽进行烷基化，同时还对血样进行SSA蛋白沉淀。前处理无需预先分离血浆/血清，在采集血样后室温条件下即可完成反应，可及时锁定巯基多肽的真实水平。巯基多肽经过烷基化后，能够大大提高质谱的离子化效率，从而提升检测的灵敏度，另外还可以提高巯基多肽的稳定性，避免受到其他氧化剂的影响。血样经过SSA蛋白沉淀后，杂质残留少，干扰少，色谱峰型好。使用同位素内标法定量巯基多肽，可以降低基质效应和人为操作误差带来的影响，结果更准确。质谱检测方法准确度和精密度更高。本发明还公开了一种对前处理后的巯基多肽生物样本的检测方法。

主权项

1.一种针对巯基多肽生物样本的前处理方法，其特征在于，所述方法包括：步骤01、制备巯基烷化剂，装入到若干EP管中备用；步骤02、分别在步骤01中的各个EP管中加入不同浓度的巯基多肽物质标曲工作液和待测样品；步骤03、分别在步骤02的各个EP管中加入巯基多肽物质内标工作液，充分混匀后在室温中静置；步骤04、分别在步骤03的各个EP管中加入SSA蛋白沉淀剂，涡旋混匀，离心处理；步骤05、从步骤04的各个EP管中取出上清液，加入到装有超纯水的EP管中，涡旋混匀；步骤06、从步骤05各管中取出混合液，分别加入装有超纯水的EP管中，涡旋混匀，转移到96孔板中，封膜待测。