[发明专利]制备用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡冻干制剂的方法

摘要

本发明涉及制备用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡冻干制剂的方法，包括步骤：使磷脂和脂肪酸用有机溶剂溶解，接着旋转蒸发除溶剂，真空干燥；向烧瓶中加水，超声波振荡使形成混悬液；混悬液加聚乙二醇，混匀，加链霉亲和素，室温孵育；将混悬液分装到玻璃瓶中，用胶塞将玻璃瓶半加塞，抽真空、冷冻、升华、干燥，压塞密封；通过针头穿刺胶塞向密塞玻璃瓶内充入包埋气体，得到冻干制剂，其可用于从外周血简易、快速、高效地分离获取免疫细胞、造血干细胞等目标细胞，避免现有磁珠法的磁珠残留、流式分选引入荧光素的弊端等问题，不需要昂贵的仪器设备、成本低、并且对所结合的靶细胞毒性极小、不易使之失活；分选出的细胞纯度、活力高。

主权项

1.制备用于细胞分选的链霉亲和素偶联微泡的冻干制剂的方法，包括如下步骤：(i)在室温下在烧瓶中使磷脂和脂肪酸用有机溶剂溶解，接着在旋转蒸发仪上于50～80℃蒸除溶剂，然后于30～40℃真空干燥；(ii)向烧瓶中加水，超声波振荡使形成混悬液；(iii)取所得混悬液，加入聚乙二醇，混匀，加入链霉亲和素，室温孵育20～45分钟；(iv)将上一步骤所得混悬液分装到玻璃瓶中，使密封用的胶塞将玻璃瓶半加塞，在真空冷冻干燥机内进行抽真空、冷冻、升华、干燥以除去水分，压塞密封，得到冻干粉末；(v)通过针头穿刺胶塞向密塞玻璃瓶内充入包埋气体，使玻璃瓶内的空间气氛充满包埋气体，即得到冻干制剂。