[发明专利]一种唾液中多种类固醇激素的固相萃取方法以及对该类固醇激素的检测方法在审
申请号: | 201910678779.5 | 申请日: | 2019-07-25 |
公开(公告)号: | CN110389185A | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
发明(设计)人: | 田瑶林;张良滔;陈婉婷 | 申请(专利权)人: | 深圳健科医学检验实验室 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 深圳市广诺专利代理事务所(普通合伙) 44611 | 代理人: | 伍华荣 |
地址: | 518000 广东省深圳市宝安区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种唾液中多种类固醇激素的固相萃取方法。该方法包括固相萃取柱活化;样本处理后加入固相萃取柱;对固相萃取柱淋洗、洗脱,收集洗脱液;加入有机溶剂涡旋混匀,室温离心处理后,转移到96孔板中,封膜待测。采用固相萃取不但可以去除杂质干扰,还可以大幅提高检测灵敏度,满足唾液中痕量类固醇激素的检测要求。与其他前处理方法相比,本法操作简单,节省溶剂,对环境影响小;分析时间短,通量高,7min内即可完成检测。本法使用同位素内标法定量类固醇激素,检测误差小,且通过全面的方法学验证,可用于唾液样本中氢化皮质酮,睾甾酮和脱氢异雄酮的检测和相关疾病的筛查。本发明还公开了一种对唾液固相萃取后的多种类固醇激素的检测方法。 | ||
搜索关键词: | 类固醇 激素 固相萃取 唾液 固相萃取柱 检测 检测灵敏度 内标法定量 环境影响 检测误差 离心处理 唾液样本 样本处理 有机溶剂 杂质干扰 方法学 皮质酮 前处理 同位素 洗脱液 睾甾酮 溶剂 封膜 痕量 混匀 活化 可用 淋洗 氢化 筛查 通量 脱氢 涡旋 洗脱 雄酮 去除 验证 疾病 分析 | ||
【主权项】:
1.一种唾液中多种类固醇激素的固相萃取方法,其特征在于,所述方法包括:步骤01、选取至少两个固相萃取柱,对其进行活化处理;步骤02、取唾液样本和类固醇激素混合标曲工作液,分别往唾液样本和类固醇激素混合标曲工作液内加入稀释剂和内标工作液;混匀后分别加入到经步骤01活化后的固相萃取柱中;步骤03、分别往经过步骤02处理后的固相萃取柱内加入淋洗液,使其流干;步骤04、分别往经过步骤03处理后的固相萃取柱内加入洗脱液,并用EP管收集洗脱液,氮气吹干;步骤05、往步骤04收取的装有洗脱液的EP管内加入甲醇溶液,涡旋混匀,室温离心处理后,转移到96孔板中,封膜待测;所述内标工作液为氘代类固醇激素。
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