[发明专利]基于CjCas9和VPR核心结构域的融合蛋白、相应的DNA靶向激活系统及其应用有效
| 申请号： | 201910687464.7 | 申请日： | 2019-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN110358753B | 公开（公告）日： | 2021-04-06 |
| 发明（设计）人： | 荣知立;林瑛;张鑫;彭欣 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/113;C12N15/85;C12N15/90 |
| 代理公司： | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人： | 范盈 |
| 地址： | 510515 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于CjCas9和VPR核心结构域的融合蛋白、相应的DNA靶向激活系统及其应用，融合蛋白，包括两个异源多肽结构域，其中一个多肽结构域包含具有转录激活活性的VPR蛋白；另一种多肽结构域包含CjCas9蛋白，所述CjCas9蛋白为dCjCas9亚型、mini‑dCjCas9亚型或CjCas9野生型，所述dCjCas9亚型中含有D8A和H559A单位点氨基酸突变；所述mini‑dCjCas9亚型包含D8A单位点氨基酸突变以及大部分HNH结构域的缺失。一种DNA靶向激活系统，包括上述所述的融合蛋白和至少一种向导RNA，所述向导RNA包含针对目的基因启动子区域设计的一段长度为14bp‑22bp的序列和一段80bp的骨架序列。上述所述的DNA靶向激活系统在进行基因的靶向激活中的应用。本发明提供的DNA靶向激活系统具有体积小特异性高，激活效果强易于合成，成本低等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 cjcas9 vpr 核心 结构 融合 蛋白 相应 dna 靶向 激活 系统 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种融合蛋白，其特征在于，包括两个异源多肽结构域，其中一个多肽结构域包含具有转录激活活性的VPR蛋白，所述VPR蛋白由三种转录激活因子vp64、p65、rta的核心结构域组成；另一种多肽结构域包含CjCas9蛋白，所述CjCas9蛋白为dCjCas9亚型、mini‑dCjCas9亚型或CjCas9野生型，所述dCjCas9亚型中含有D8A和H559A单位点氨基酸突变；所述mini‑dCjCas9亚型包含D8A单位点氨基酸突变以及大部分HNH结构域的缺失。
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