[发明专利]克胰素的合成方法和应用

摘要

本发明涉及克胰素技术领域，具体提供一种克胰素的合成方法和应用。该合成方法包括：提供包括第1～11位氨基酸的肽片段1、包括第12～24位氨基酸的肽片段2、包括第25～33位氨基酸的肽片段3、包括第34～39位氨基酸的肽片段4、包括第40～55位氨基酸的肽片段5；将肽片段4、3和2逐步偶联，并脱除第13位和第35位半胱氨酸的保护基，氧化得到含一对二硫键的全保护肽片段8，将肽片段5、8和1逐步偶联，得到全保护的克胰素肽片段10，经裂解、氧化形成第4位和第52位半胱氨酸连接的二硫键，脱除第27位和第48位半胱氨酸上的保护基，氧化，得到克胰素。本合成方法具有工艺稳定性好，合成效率高，纯度高等特点。

主权项

1.一种克胰素的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S01.提供肽片段1、肽片段2、肽片段3、肽片段4、肽片段5；其中，肽片段1包含克胰素主链序列中的第1‑11位氨基酸和载体；肽片段2包含克胰素主链序列中的第12‑24位氨基酸和载体；肽片段3包含克胰素主链序列中的第25‑33位氨基酸和载体；肽片段4包含克胰素主链序列中的第34‑39位氨基酸和载体；肽片段5包含克胰素主链序列中的第40‑55位氨基酸和载体；步骤S02.在裂解液作用下，分别将肽片段1、肽片段2、肽片段3从载体上裂解，得到全保护肽片段1’、肽片段2’、肽片段3’；脱除肽片段4上的氨基保护基，在缩合剂和活化剂的作用下，使肽片段3’与肽片段4发生偶联，得到肽片段6；脱除肽片段6的氨基保护基，在缩合剂与活化剂的作用下，使肽片段1’与肽片段6发生偶联，得到肽片段7；步骤S03.在裂解液作用下，将肽片段7从载体上裂解，得到全保护肽片段7’；对肽片段7’进行氧化处理，使得肽片段7’上的第7位半胱氨酸和第13位半胱氨酸上的保护基脱除，并氧化连接成全保护肽片段8；步骤S04.脱除肽片段5上的氨基保护基，在缩合剂与活化剂的作用下，使肽片段5和肽片段8发生偶合，得到肽片段9；在缩合剂与活化剂的作用下，使得肽片段9和肽片段1发生偶合，得到肽片段10；步骤S05.在裂解液作用下，使得肽片段10从载体上裂解，得到肽片段11；步骤S06.对肽片段11进行氧化处理，使得肽片段11上第4位半胱氨酸与第52位半胱氨酸氧化连接，得到肽片段12；步骤S07.对肽片段12进行氧化处理，使得肽片段12的第27位半胱氨酸和第48位半胱氨酸上的保护基脱除并发生氧化连接，得到克胰素。