[发明专利]一种LMH细胞体外分离鉴定鸭圆环病毒的方法在审
| 申请号： | 201910707293.X | 申请日： | 2019-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN110452888A | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 张恒;朱海燕;宋桂才;刘志亮;薛希娟;王洪林;赵汉蒿;乔光耀 | 申请（专利权）人： | 山东诸子生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00 |
| 代理公司： | 37255 潍坊正信致远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张晓琳<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 262200山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种LMH细胞体外分离鉴定鸭圆环病毒的方法，包括以下步骤：（1）鸭圆环病料；（2）鸭圆环病料处理；（3）LMH细胞：细胞复苏后，传代3‑5代后准备接毒；（4）接毒：细胞传代贴壁后5‑6小时进行接毒；（5）添加D‑氨基葡萄糖和胰酶；（6）病毒培养与收获：接毒后继续培养至72小时进行收获，反复冻融3次，离心收获上清液；（7）病毒鉴定：采用PCR方式对收获每代鸭圆环病毒和阳性病料进行鉴定；（8）鉴定阳性样品送检测序。由于采用了上述技术方案，本发明具有以下有益效果：本发明首次实现了鸭圆环病毒体外细胞传代培养，初步解决了目前鸭圆环病毒不能体外培养的问题；对于更深入了解鸭圆环病毒致病机理奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 鸭圆环病毒 病料 圆环 收获 传代 氨基葡萄糖 病毒鉴定 病毒培养 传代培养 反复冻融 离心收获 体外培养 体外细胞 细胞传代 细胞复苏 阳性样品 致病机理 上清液 贴壁 胰酶 性病 检测 | ||
【主权项】：
1.一种LMH细胞体外分离鉴定鸭圆环病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）鸭圆环病料：经PCR鉴定为阳性；/n（2）鸭圆环病料处理：取适量脾脏，加入5倍体积PBS进行研磨，研磨后经0.22微米滤器进行无菌过滤；/n（3）LMH细胞：细胞复苏后，传代3-5代后准备接毒；/n（4）接毒：细胞传代贴壁后5-6小时进行接毒；/n（5）添加D-氨基葡萄糖和胰酶；/n（6）病毒培养与收获：接毒后继续培养至72小时进行收获，反复冻融3次，离心收获上清液；/n（7）病毒鉴定：采用PCR方式对收获每代鸭圆环病毒和阳性病料进行鉴定；/n（8）鉴定阳性样品送检测序。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东诸子生物科技有限公司，未经山东诸子生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910707293.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
