[发明专利]可曝光预染蛋白marker及其制备方法、应用在审
申请号: | 201910709005.4 | 申请日: | 2019-08-01 |
公开(公告)号: | CN110408639A | 公开(公告)日: | 2019-11-05 |
发明(设计)人: | 方卫斌 | 申请(专利权)人: | 天德悦(北京)生物科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C07K1/13;G01N33/532;G01N33/561;G01N33/58;G01N33/68 |
代理公司: | 北京集智东方知识产权代理有限公司 11578 | 代理人: | 陈亚斌;关兆辉 |
地址: | 102200 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种可曝光预染蛋白marker及其制备方法、应用,包括如下步骤:S1、根据各蛋白条带分子量大小设计对应的基因片段,并确定与之对应的表达载体;S2、预备所述表达载体,并通过PCR扩增获得所述基因片段;将基因片段连接到与之对应的表达载体上,并转入宿主细胞内进行表达、纯化;S3、将不同分子量大小的发光蛋白分别与染料混合,以获得不同分子量的预染蛋白;S4、将不同分子量大小的预染蛋白按预设比例混合,得到可曝光预染蛋白marker。其制备方法简单、易操作,且制备获得的可曝光预染蛋白marker即是可见的预染蛋白,又是可以发光的发光蛋白,且显现在X胶片上。 | ||
搜索关键词: | 蛋白 制备 表达载体 基因片段 曝光 发光蛋白 条带分子量 染料混合 宿主细胞 预设 应用 发光 预备 转入 | ||
【主权项】:
1.一种可曝光预染蛋白marker的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、根据预染发光蛋白marker中各蛋白条带分子量大小设计对应的核酸片段,并确定与之对应的表达载体;S2、预备所述表达载体,并通过PCR扩增获得所述基因片段;将核酸片段连接到与之对应的表达载体上,并转入宿主细胞内进行表达、纯化,以得到与条带对应的不同分子量大小的发光蛋白;S3、将不同分子量大小的发光蛋白分别与染料混合,以获得不同分子量的预染蛋白;S4、将不同分子量大小的预染蛋白按预设比例混合,得到可曝光预染蛋白marker。
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