[发明专利]一种检测大围山微型鸡BPI基因SNP的PCR-RFLP方法在审
| 申请号： | 201910716177.4 | 申请日： | 2019-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN110317885A | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 李密杰;张春梅 | 申请（专利权）人： | 红河学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12Q1/683;C12N15/11 |
| 代理公司： | 昆明合盛知识产权代理事务所(普通合伙) 53210 | 代理人： | 吴茜 |
| 地址： | 661100 云南省红*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种快速检测大围山微型鸡杀菌通透性增强蛋白(BPI)基因单核苷酸多态性(SNP)的PCR‑RFLP(PCR‑限制性片段长度多态性)方法，该方法利用限制性内切酶对包含该单核苷酸多态性位点的基因序列进行酶切，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行片段大小分离，利用凝胶成像系统分析其片段大小，从而确定其SNP。本发明所述的方法为检测中国大围山微型鸡BPI基因遗传变异提供了技术支持；利用本方法检测的SNP位点为研究BPI功能及BPI SNP与免疫性状关系提供科学数据，为大围山微型鸡遗传育种领域标记辅助选择(MAS)在免疫性状的运用提供宝贵资料，利于快速建立免疫性能好的优质大围山微型鸡种质资源。 | ||
| 搜索关键词： | 免疫性状 限制性片段长度多态性 单核苷酸多态性位点 杀菌通透性增强蛋白 单核苷酸多态性 琼脂糖凝胶电泳 标记辅助选择 基因遗传变异 凝胶成像系统 限制性内切酶 关系提供 基因序列 技术支持 科学数据 快速检测 快速建立 遗传育种 种质资源 基因 种检测 检测 酶切 分析 研究 | ||
【主权项】：
1.一种检测大围山微型鸡BPI基因SNP位点的PCR‑RFLP方法，其特征在于，以大围山微型鸡基因组DNA或包含BPI基因的DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用一对聚合酶链式反应引物，在PCR条件下进行扩增，然后利用限制性内切酶对其进行酶切，再通过电泳检测即可鉴定大围山微型鸡BPI基因SNP位点；所述的聚合酶链式反应引物包括：上游引物：5'‑GTGCTTCCTTCCTATTCTGC‑3'；下游引物：5'‑CTCAAAACCTGCTTCCACC‑3'。
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