[发明专利]一种十字花科蔬菜立枯丝核菌的三重荧光定量PCR检测方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201910717500.X | 申请日： | 2019-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN110669858B | 公开（公告）日： | 2022-06-24 |
| 发明（设计）人： | 石延霞;李宝聚;王朵;谢学文;柴阿丽 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京中珒知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11806 | 代理人： | 王中 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种十字花科蔬菜立枯丝核菌的三重荧光定量PCR检测试剂盒，包括3对引物及探针：AG‑2‑1‑F、AG‑2‑1‑R、AG‑2‑1‑P、AG‑1‑IB‑F、AG‑1‑IB‑R、AG‑1‑IB‑P、AG‑4HGII‑F、AG‑4HGII‑R、AG‑4HGII‑P。该试剂盒还包括三重荧光定量PCR检测预混液、空白对照品、阴性对照品以及阳性对照品。本发明以立枯丝核菌病害的3种优势融合群标准菌株为阳性材料，以白菜植物组织为阴性材料，以其他土传病原菌为鉴别材料，使用多重荧光定量PCR进行检测，结果准确，灵敏度高，重复性好，引物及探针具有极高的特异性，能够快速、准确的鉴定十字花科蔬菜立枯丝核菌。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 十字花科 蔬菜 立枯丝核菌 三重 荧光 定量 pcr 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种十字花科蔬菜立枯丝核菌的三重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中包括用于扩增检测立枯丝核菌融合群AG-2-1、AG-1-IB和AG-4HGII的3对引物及各自对应的探针，所述3对引物及其各自对应的探针序列分别为：/n上游引物AG-2-1-F：GCTACAACCCCAAGTCGG；/n下游引物AG-2-1-R：GTAAAAGCGTAAACCTGGGTG；/n荧光探针AG-2-1-P：5’-FAM-CCTATCTCTGGATGGCACGGTGAC-TAMRA-3’；/n上游引物AG-1-IB-F：AACAAGATGGACACTACCAAGG；/n下游引物AG-1-IB-R：GGTCCTCGCTCCACTATAAAG；/n荧光探针AG-1-IB-P：5’-VIC-AGTACAAACTCCACTCGGGTAACGACA-TAMRA-3’；/n上游引物AG-4HGII-F：GCGCGGTAAAGGAATTTTGC；/n下游引物AG-4HGII-R：GACAATAAATTTCGCTACCTTAGGC；/n荧光探针AG-4HGII-P：5’-CY5-AAGGAGCCCTGCGGGTTATAAATATGTG-BHQ2-3’。/n
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