[发明专利]一种高分辨率熔解曲线鉴定耳念珠菌的方法在审
| 申请号： | 201910726815.0 | 申请日： | 2019-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN110408720A | 公开（公告）日： | 2019-11-05 |
| 发明（设计）人： | 肖盟;龚杰;黄晶晶;范欣;徐英春;张建中 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院北京协和医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京驰纳智财知识产权代理事务所(普通合伙) 11367 | 代理人： | 李佳佳 |
| 地址： | 100730 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种高分辨率熔解曲线鉴定耳念珠菌的方法，包括如下步骤：步骤一、准备待鉴定菌株包括耳念菌株和对照菌株的DNA模板；步骤二、设计上下游引物；步骤三、利用高分辨率溶解曲线技术HRM，获取各菌株高分辨溶解曲线图，具体为利用Real‑time PCR技术，通过实时检测DNA熔解过程中荧光信号值的变化获取各菌株高分辨溶解曲线图；步骤四、利用分析软件分析鉴定待鉴定菌株的具体类型；步骤五、测定步骤三中结果为阳性菌株的核苷酸序列；步骤六、验证鉴定方法的灵敏度。本发明提供高分辨率熔解曲线鉴定耳念珠菌的方法，可以明确鉴定耳念珠菌并与相近的菌株进行区分，方法操作简单，准确高效。 | ||
| 搜索关键词： | 菌株 高分辨率 念珠菌 熔解曲线 溶解 高分辨 核苷酸序列 分析鉴定 分析软件 实时检测 阳性菌株 荧光信号 灵敏度 熔解 引物 验证 | ||
【主权项】：
1.一种高分辨率熔解曲线鉴定耳念珠菌的方法，包括如下步骤：步骤一、准备待鉴定菌株包括耳念菌株和对照菌株的DNA模板；步骤二、设计上下游引物；步骤三、利用高分辨率溶解曲线技术HRM，获取各菌株高分辨溶解曲线图，具体为利用Real‑time PCR技术，通过实时检测DNA熔解过程中荧光信号值的变化获取各菌株高分辨溶解曲线图；步骤四、利用分析软件分析鉴定待鉴定菌株的具体类型；步骤五、测定步骤三中结果为阳性菌株的核苷酸序列；步骤六、验证鉴定方法的灵敏度。
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