[发明专利]一种用于α-半乳糖苷酶产生菌快速筛选的培养基及其应用在审

专利信息
申请号: 201910728320.1 申请日: 2019-08-08
公开(公告)号: CN110331115A 公开(公告)日: 2019-10-15
发明(设计)人: 刘德海;王佰涛;权淑静;王一雯;马焕;杨文玲;王继雯;刁文涛;丁芳;陈国参 申请(专利权)人: 河南省科学院生物研究所有限责任公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12R1/07
代理公司: 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 代理人: 聂孟民
地址: 450003*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明涉及用于α‑半乳糖苷酶产生菌快速筛选的培养基及其应用,可有效快速寻找筛选出自然条件下产α‑半乳糖苷酶微生物的问题,培养基由:蜜二糖5.0~10.0g、棉子糖5.0~10.0g、水苏糖5.0~10.0g、蛋白胨5.0~8.0g、KCl 0.1~0.3g、Na2HPO4 0.2~0.5g、MgSO4·7H2O 0.5~1.0g、MnSO4 0.1~0.3g、X‑α‑Gal(5‑溴‑4‑氯‑3‑吲哚‑α‑D‑半乳糖苷)0.02~0.04g和琼脂20.0g加蒸馏水至1000mL,调pH7.1~7.5制成;把X‑α‑Gal溶解于二甲基甲酰胺中,过滤除菌;其余组分用蒸馏水溶解,灭菌,然后加入X‑α‑Gal溶液,混匀,加无菌蒸馏水至1000mL,调pH7.1~7.5,快速倒平板,即成。本发明操作简单方便易行,可快速筛选出α‑半乳糖苷酶产生菌,时间仅35h,有巨大的经济和社会效益。
搜索关键词: 半乳糖苷酶 快速筛选 培养基 产生菌 二甲基甲酰胺 无菌蒸馏水 蒸馏水溶解 过滤除菌 加蒸馏水 快速寻找 自然条件 半乳糖 蛋白胨 蜜二糖 棉子糖 水苏糖 灭菌 混匀 琼脂 吲哚 微生物 应用 溶解 筛选
【主权项】:
1.一种用于α‑半乳糖苷酶产生菌快速筛选的培养基,其特征在于,所述的培养基是以下重量计的:蜜二糖5.0~10.0g、棉子糖5.0~10.0g、水苏糖5.0~10.0g、蛋白胨5.0~8.0g、KCl 0.1~0.3g、Na2HPO4 0.2~0.5g、MgSO4·7H2O 0.5~1.0g、MnSO4 0.1~0.3g、X‑α‑Gal 0.02~0.04g和琼脂20.0g加蒸馏水至1000mL,调pH7.1~7.5制成;其中,首先把X‑α‑Gal溶解于二甲基甲酰胺中,制成质量浓度为20mg/mL的X‑α‑Gal溶液,0.22µm滤膜过滤除菌,得过滤除菌后的X‑α‑Gal溶液,备用;再将其余组分用蒸馏水溶解, 121℃灭菌20分钟,冷却至55℃,然后加入上述过滤除菌后的X‑α‑Gal溶液,混匀,加无菌蒸馏水至1000mL,用盐酸或氢氧化钠调节为pH7.1~7.5,快速倒平板,即成α‑半乳糖苷酶产生菌快速筛选的培养基平板。
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