[发明专利]基因文库的构建方法、待测核酸样本基因突变的检测方法及试剂盒在审
申请号: | 201910740908.9 | 申请日: | 2019-08-12 |
公开(公告)号: | CN110396534A | 公开(公告)日: | 2019-11-01 |
发明(设计)人: | 宋炎;张娜;蔡宇航;孟培;刘玉朋;邵林;林木飞;夏敏;朱长斌;于竞;石太平 | 申请(专利权)人: | 华大生物科技(武汉)有限公司;天津华大医学检验所有限公司;深圳华大基因股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12N15/10;C40B50/06 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 张立 |
地址: | 430075 湖北省武汉市东湖高新技术开发区高新*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种基因文库的构建方法、待测核酸样本基因突变的检测方法及试剂盒。该基因文库的构建方法包括基于待测核酸样本,进行末端修复,加A,获得经修复的末端加A的核酸样本;然后和组合标签接头进行连接,以便获得连接有组合标签接头的核酸样本;扩增以便获得所述测序文库;所述组合标签接头含有组合标签和接头序列,所述组合标签包括至少两组标签,所述至少两组标签的每一组含有至少两个标签序列,其中每一组内任意标签序列间的汉明距离大于等于2,每一组间任意标签序列间的汉明距离大于等于1。由此构建的文库进行测序,可以提高测序质量以及降低样本间的污染,可以应用于肿瘤多基因的突变检测,从而在临床上用于肿瘤的预防和诊断。 | ||
搜索关键词: | 核酸样本 组合标签 构建 标签序列 基因文库 汉明距离 基因突变 试剂盒 测序 两组 肿瘤 标签 测序文库 接头序列 末端修复 突变检测 多基因 检测 扩增 文库 样本 修复 诊断 污染 预防 应用 | ||
【主权项】:
1.一种基因文库的构建方法,其特征在于,包括:基于待测核酸样本,进行末端修复,加A,以便获得经修复的末端加A的核酸样本;将所述经修复的末端加A的核酸样本和组合标签接头进行连接,以便获得连接有组合标签接头的核酸样本;基于所述连接有组合标签接头的核酸样本,进行第一扩增,以便获得所述测序文库;其中,所述组合标签接头含有组合标签和接头序列,所述组合标签包括至少两组标签,所述至少两组标签的每一组含有至少两个标签序列,所述至少两组标签的每一组内任意标签序列间的汉明距离大于等于2,优选大于等于3,所述至少两组标签的每一组间任意标签序列间的汉明距离大于等于1,优选大于等于2。
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