[发明专利]一种甲烷菌中高活性甲基辅酶M还原酶提取工艺在审
| 申请号： | 201910754234.8 | 申请日： | 2019-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN110423800A | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 周玉珍;宦海霞;汪伟;徐建明;唐玉玲 | 申请（专利权）人： | 淮阴师范学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N9/02 |
| 代理公司： | 南京业腾知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32321 | 代理人： | 董存壁 |
| 地址： | 223300 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种甲烷菌中高活性甲基辅酶M还原酶提取工艺，包括如下步骤：S1、进行土壤和气体分析，培养甲烷菌；S2、检测单不饱和脂肪酸异戊烯基侧链的碳氢化合物表示的乙酸分解的存在；S3、从土壤中提取DNA；S4、实时定量PCR和克隆库的分析甲基辅酶M还原酶；S5、mcrA基因的克隆和测序后进行统计分析，本发明结构科学合理，使用安全方便，在提取前，对于甲烷菌进行培育，通过土壤下压，从而排出土壤中的空气，提高其无氧效果，让甲烷菌的产量与数量均可以得到保障，而通过10‑22度，是甲烷菌最适合繁殖的温度，从而提高了其自身繁殖速率，并且通过有机肥增加其繁殖的肥料，而在提取其DNA后进行分析，检测甲基辅酶M还原酶的活性。 | ||
| 搜索关键词： | 甲烷菌 还原酶 辅酶 土壤 繁殖 高活性 克隆 单不饱和脂肪酸 乙酸 实时定量PCR 碳氢化合物 分析甲基 结构科学 气体分析 异戊烯基 统计分析 提取DNA 检测 有机肥 侧链 测序 排出 无氧 下压 肥料 分解 基因 培育 分析 | ||
【主权项】：
1.一种甲烷菌中高活性甲基辅酶M还原酶提取工艺，其特征在于：包括如下步骤：S1、进行土壤和气体分析，培养甲烷菌；S2、检测单不饱和脂肪酸异戊烯基侧链的碳氢化合物表示的乙酸分解的存在；S3、从土壤中提取DNA；S4、实时定量PCR和克隆库的分析甲基辅酶M还原酶；S5、mcrA基因的克隆和测序后进行统计分析。
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