[发明专利]利用两步盐析萃取分离纯化噬菌体裂解液中噬菌体的方法有效
| 申请号： | 201910807570.4 | 申请日： | 2019-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN110484514B | 公开（公告）日： | 2022-08-30 |
| 发明（设计）人： | 修志龙;张志荣;沈俊涛 | 申请（专利权）人： | 大连理工大学 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人： | 李银姬;李馨 |
| 地址： | 116024 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明属于生物工程技术领域，提供了一种利用两步盐析萃取分离纯化噬菌体裂解液中噬菌体的方法。该方法为：将柠檬酸钠或磷酸氢二钾溶解于噬菌体裂解液中，加入乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂，温和涡旋混合，分相形成上、中、下三相的三相体系，完成第一步盐析萃取；向第一步盐析萃取所得下相溶液中加入正丙醇等亲水性有机溶剂，进行第二步盐析萃取，噬菌体在中间相得到富集和纯化。本发明解决了目前噬菌体分离工艺中存在的噬菌体与细菌代谢物难以分离、成本高等问题。该方法工艺简单、分离时间短、回收率高、分离成本低、除杂率高，是一种很有工业应用前景的分离方法。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 两步盐析 萃取 分离 纯化 噬菌体 裂解 方法 | ||
【主权项】：
1.一种两步盐析萃取分离噬菌体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n(1)制备含有噬菌体裂解液和可溶性盐的混合溶液；/n(2)将步骤(1)所得混合溶液与有机溶剂A混合，分相得到富含有机溶剂A的上相溶液、凝集中间相以及富含盐和噬菌体的下相组成的三相体系I；/n(3)将步骤(2)所得下相与有机溶剂B混合，分相得到富含有机溶剂B的上相溶液、富含噬菌体的凝集中间相以及富含盐、杂蛋白和内毒素的下相组成的三相体系II。/n
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