[发明专利]一种利用胚胎干细胞实验模型检测氢醌的胚胎毒性方法在审
申请号: | 201910830406.5 | 申请日: | 2019-09-04 |
公开(公告)号: | CN110438195A | 公开(公告)日: | 2019-11-12 |
发明(设计)人: | 杨慧慧 | 申请(专利权)人: | 杨慧慧 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 234200 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明提供了一种利用胚胎干细胞实验模型检测氢醌的胚胎毒性方法,本发明通过小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的制备、小鼠胚胎干细胞的培养和氢醌对小鼠胚胎干细胞的毒性作用三个步骤,通过计算IC503T3、ID50和IC50ES来判断氢醌对小鼠胚胎干细胞的毒性作用,本发明一种利用胚胎干细胞实验模型检测氢醌的胚胎毒性方法,可以有效的检测氢醌的胚胎毒性,本方法可以进一步推断氢醌为强胚胎毒性化合物,为进一步评价氢醌的安全性提供了研究数据,具有良好的社会经济效益。 | ||
搜索关键词: | 氢醌 胚胎毒性 小鼠胚胎干细胞 胚胎干细胞 实验模型 检测 毒性作用 小鼠胚胎成纤维细胞 社会经济效益 安全性提供 三个步骤 饲养层 制备 推断 研究 | ||
【主权项】:
1.一种利用胚胎干细胞实验模型检测氢醌的胚胎毒性方法,其特征在于:所述的氢醌的胚胎毒性的检测方法步骤如下:S1小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的制备:处死孕期小鼠,无菌条件下取出小鼠胚胎,从胚胎中分离小鼠胚胎成纤维细胞,将所述的鼠胚胎成纤维细胞接种于培养瓶中培养、扩增,经过γ射线照射,冻存于液氮中,置于6孔板中保存备用;S2小鼠胚胎干细胞的培养:从液氮中取出小鼠ES‑E14TG2a复苏,接种于步骤S1中已铺好成纤维细胞饲养层的6孔板中,采用ESC常规培养基进行培养;2~3d后,小鼠胚胎干细胞克隆达60~70%融合时传代;S3氢醌对小鼠胚胎干细胞的毒性作用:将氢醌从1mg/mL开始,依次按1:10进行梯度稀释,设7个检测浓度,分别进行细胞毒性和分化抑制实验,获得各个试验的检测终点,对小鼠胚胎干细胞进行毒性评价。
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