[发明专利]一种黄果野鸦椿的组织培养方法

摘要

一种黄果野鸦椿的组织培养方法，涉及植物组织培养方法。利用选取黄果野鸦椿复叶为外植体，利用黄果野鸦椿复叶的生理习性，在瓶苗诱导初期设置5～7d缓冲实验的方式，遴选获得无菌外植体，在培养过程中小叶逐渐脱落，叶轴上形成愈伤创面，进而培养愈伤组织，获得黄果野鸦椿的再生植株，很好地解决了黄果野鸦椿的组织培养技术难题。以黄果野鸦椿复叶为外植体，其初步诱导、愈伤组织诱导、成苗诱导、丛生芽诱导、生根诱导和驯化培养过程均为常规组织培养所需的材料，培养基质容易获取，设备简单，成本低廉。

主权项

1.一种黄果野鸦椿的组织培养方法，其特征在于包括以下步骤：/n⑴截取一年生黄果野鸦椿无分枝枝条，冲洗后室内水培；/n⑵选取靠近枝条顶端的叶片清洗，冲洗，沥干水分，置入超净工作台；切取复叶用75％乙醇浸泡后无菌水冲洗，然后汞溶液消毒，再无菌水冲洗，沥干水分，得黄果野鸦椿复叶小段，备用；/n⑶将步骤⑵获得的黄果野鸦椿复叶小段接种于MS无激素培养基中进行无菌诱导培养，培养5～7d，得无菌黄果野鸦椿复叶小段；/n⑷将步骤⑶获得的无菌黄果野鸦椿复叶小段从培养基中取出，在超净工作台上，沿叶轴方向留0.5cm左右，切除其余小叶，接种于愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织诱导，经过120～150d培养，可分化一定数量的黄果野鸦椿愈伤组织；/n⑸将步骤⑷获得的黄果野鸦椿愈伤组织，转接至初代诱导培养基中成苗诱导，经30d左右培养出苗，得黄果野鸦椿幼苗；/n⑹将步骤⑸获得的黄果野鸦椿幼苗，转接至增殖培养基中，进行丛生芽诱导，培养周期30d左右，得黄果野鸦椿幼苗；/n⑺从步骤⑹获得的黄果野鸦椿幼苗中，选取株高大于1cm、着生2～4片复叶、生长健壮的植株，转接至生根培养基进行生根诱导，培养周期30～60d；/n⑻从步骤⑺生根诱导后的黄果野鸦椿幼苗中，选取株高2～3cm、着生6片复叶、根数为3～5条，根长大于2cm，生长健壮的幼苗，进行带瓶、揭盖、遮阴、保湿的室外驯化培养，培养周期为5～7d。/n