[发明专利]一种抗HER3单链抗体的制备方法在审
| 申请号： | 201910854982.3 | 申请日： | 2019-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN110760003A | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 赵林;李黄金;何佩彦 | 申请（专利权）人： | 广东药科大学 |
| 主分类号： | C07K16/32 | 分类号： | C07K16/32;C12N15/13;C12N15/81;C12N1/19;C07K1/20;C07K1/22;C12R1/84 |
| 代理公司： | 44102 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人： | 段卉 |
| 地址： | 510006 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种抗HER3单链抗体的制备方法，包括以下步骤，设计抗HER3单链抗体基因，其序列如SEQ ID NO：1所示，并合成该基因，并克隆至质粒pGAPZαA中，获得重组质粒；将重组质粒转化至毕赤酵母，并筛选出高表达菌株；将筛选出的高表达菌株在液体YPD培养基中进行发酵，获得发酵液并浓缩发酵液；进行疏水层析纯化；进行镍柱亲和层析纯化；进行G25分子筛置换缓冲液。本发明成功使得抗HER3单链抗体在毕赤酵母中高水平表达，实现利用重组酵母菌株进行发酵获取的发酵上清液中高效纯化抗HER3单链抗体，纯化产物纯度高，并且产率高，其抗HER3‑scFv得到正确表达，并可特异识别HER3，有利于抗HER3单链抗体的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 单链抗体 毕赤酵母 高表达 菌株 发酵 分子筛 筛选 单链抗体基因 镍柱亲和层析 重组酵母菌株 重组质粒转化 发酵上清液 高水平表达 浓缩发酵液 纯化产物 高效纯化 疏水层析 特异识别 重组质粒 发酵液 缓冲液 产率 质粒 制备 置换 克隆 合成 基因 应用 成功 | ||
【主权项】：
1.一种抗HER3单链抗体，其特征在于，其氨基酸如SEQ ID NO：2所示。/n
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