[发明专利]一种从临床血液中检测大肠埃希菌病原菌的方法在审
| 申请号： | 201910861066.2 | 申请日： | 2019-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN110499378A | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 李敬;王旭;孙宝林;郭建;吴谨 | 申请（专利权）人： | 卓源健康科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 34120 合肥顺超知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 张芳<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 230088 安徽省合肥市高新区望*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种从临床血液中检测大肠埃希菌病原菌的方法，包括以下步骤：S1、血液中大肠埃希菌基因组DNA的提取；S2、血液中大肠埃希菌PCR检测：S2.1、利用大肠埃希菌基因组DNA序列设计特异性的PCR引物，正向引物如SEQ ID NO.1所示；反向引物如SEQ ID NO.2所示；引物的扩增片段长度为200bp；S2.2、以大肠埃希菌基因组DNA为模板，采用特异性的PCR引物进行PCR扩增；S2.3、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测，扩增出长度为200bp的片段则判定为检测出大肠埃希菌。本发明对血液中大肠埃希菌的检测极限达到100CFU/mL，通过直接对临床血液中大肠埃希菌基因组DNA的快速提取并进行特异基因的快速PCR检测，可实现对血液中大肠埃希菌感染及时有效的诊断。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠埃希菌 基因组DNA 检测 血液 临床血液 病原菌 大肠埃希菌感染 琼脂糖凝胶电泳 基因组DNA序列 反向引物 快速提取 扩增片段 特异基因 正向引物 快速PCR 扩增 引物 判定 诊断 | ||
【主权项】：
1.一种从临床血液中检测大肠埃希菌病原菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、血液中大肠埃希菌基因组DNA的提取；/nS2、血液中大肠埃希菌PCR检测：/nS2.1、利用大肠埃希菌基因组DNA序列设计一段特异性的PCR引物，所述PCR引物包括正向引物和反向引物；/n所述正向引物如SEQ ID NO.1所示：5’-TAATGTTCTGCGACGCTCAC-3’；/n所述反向引物如SEQ ID NO.2所示：5’-CCCGGCTAACGTATCCAC-3’；/n引物的扩增片段长度为200bp；/nS2.2、以步骤S1中从血液中提取的大肠埃希菌基因组DNA为模板，采用步骤S2.1中的特异性的PCR引物进行PCR扩增；/nS2.3、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测，扩增出长度为200bp的片段则判定为检测出大肠埃希菌。/n
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