[发明专利]一种快速纯化血清中IgG和IgE的方法在审
| 申请号： | 201910863313.2 | 申请日： | 2019-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN110567787A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 王彦波;傅玲琳;王翀 | 申请（专利权）人： | 浙江工商大学 |
| 主分类号： | G01N1/34 | 分类号： | G01N1/34 |
| 代理公司： | 35232 厦门创象知识产权代理有限公司 | 代理人： | 尤怀成;王凤玲 |
| 地址： | 310012 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速纯化血清中IgG和IgE的方法，该方法包括：构建串联亲和纯化系统，首先利用Protein G琼脂糖凝胶与血清混合孵育，以获得结合成分A和流穿成分B；再利用Protein L琼脂糖凝胶与所述流穿成分B混合孵育，以获得结合成分C和流穿成分D；接着，利用甘氨酸缓冲液洗脱所述结合成分A，收集洗脱液，用HEPES‑Na缓冲液中和，以获得纯化后的IgG溶液；最后，利用甘氨酸缓冲液洗脱所述结合成分C，收集洗脱液，用HEPES‑Na缓冲液中和，以获得纯化后的IgE溶液。该纯化方法能够在1小时内从少量血清样品中分别纯化得到IgG和IgE，从而为食物过敏原的检测提供材料。 | ||
| 搜索关键词： | 甘氨酸缓冲液 混合孵育 缓冲液 洗脱液 血清 洗脱 中和 琼脂糖凝胶 食物过敏原 亲和纯化 血清样品 再利用 构建 串联 检测 | ||
【主权项】：
1.一种快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将Protein G琼脂糖凝胶与血清混合孵育，以获得结合成分A和流穿成分B；/n(2)将Protein L琼脂糖凝胶与所述流穿成分B混合孵育，以获得结合成分C和流穿成分D；/n(3)将所述结合成分A用甘氨酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，洗脱液用HEPES-Na缓冲液中和，以获得纯化IgG溶液；/n(4)将所述结合成分C用甘氨酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，洗脱液用HEPES-Na缓冲液中和，以获得纯化IgE溶液。/n
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