[发明专利]单细胞测序的建库方法在审
| 申请号： | 201910868822.4 | 申请日： | 2019-09-16 |
| 公开（公告）号： | CN110438572A | 公开（公告）日： | 2019-11-12 |
| 发明（设计）人： | 孔培涛;李奇;陈亚庆;杨圳;蔡建飞 | 申请（专利权）人： | 上海其明信息技术有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京金信知识产权代理有限公司 11225 | 代理人： | 李雪芹;徐琳 |
| 地址： | 201210 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种单细胞测序的建库方法，其包括(a)对甲醛固定的细胞利用第一反转录引物进行细胞内反转录标记第一轮条形码(barcode)；(b)利用连接反应，使用第二轮引物和第三轮引物标记第二轮和第三轮barcode；(c)裂解生成子文库，模板转换后，利用PCR富集模板；(d)利用index PCR标记第四轮barcode。本发明的建库方法采用固定的细胞或者细胞核作为实验材料，而不仅限于新鲜的样品，允许样品来源的复杂性，可以更为有效地利用样品。 | ||
| 搜索关键词： | 建库 固定的 细胞 测序 细胞核 反转录引物 连接反应 模板转换 实验材料 样品来源 引物标记 条形码 对甲醛 反转录 生成子 有效地 富集 裂解 引物 文库 新鲜 | ||
【主权项】：
1.单细胞测序的建库方法，其包括以下步骤：(a)对甲醛固定的细胞利用第一反转录引物进行细胞内反转录标记第一轮条形码(barcode)；(b)利用连接反应，使用第二轮引物和第三轮引物标记第二轮和第三轮barcode；(c)裂解生成子文库，模板转换后，利用PCR富集模板；(d)利用index PCR标记第四轮barcode。
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