[发明专利]一种快速提取细菌基因组DNA的方法在审

专利信息
申请号: 201910870504.1 申请日: 2019-09-16
公开(公告)号: CN110551717A 公开(公告)日: 2019-12-10
发明(设计)人: 丁兆军;张春雷;张蒙悦 申请(专利权)人: 山东大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 37221 济南圣达知识产权代理有限公司 代理人: 李健康
地址: 250100 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明公开了一种快速提取细菌基因组DNA的方法,步骤只有破壁、沉淀、干燥与溶解三步,大大简化了细菌基因组提取步骤,且提取时间仅需15‑30min即可完成细菌基因组DNA的提取。本发明方法明显降低了对实验设备的要求及提取成本,减少了劳动力的投入,具有省时、省力、省钱、简单、安全的优点,应用前景广阔。
搜索关键词: 细菌基因组DNA 应用前景广阔 细菌基因组 快速提取 实验设备 破壁 省时 省力 沉淀 溶解 安全
【主权项】:
1.一种快速提取细菌基因组DNA的方法,步骤是:/n1)破壁:刮取待提取的生长于培养基上的细菌菌落或离心收集处于生长对数期的菌体,以湿菌0.5~10mg:500μL提取液的比例将收取的细菌浸于DNA提取液中,60-80℃条件下放置5-30min,破碎细胞;其中所述DNA提取液的配方是:150±20mM Tris,30±5mM EDTA,1%(w/v)SDS,用盐酸调pH值为7.7~8.0;/n2)沉淀:将步骤1)处理的菌液以12000±2000rpm离心5~10min或静置,吸取上清液移至新的离心管,其过程中避免吸到破碎的菌体,然后再加入吸取液等体积的异丙醇,颠倒混匀,4℃,12000±2000rpm离心5~10min,弃上清;/n3)干燥与溶解:将弃上清后的离心管中残留的液体充分吸净,放置离心管使其自然晾干或在超净台中将离心管吹干,然后加入灭菌的ddH
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