[发明专利]一种利用玉米种子快速检测分子特征和品种纯度的方法在审
| 申请号： | 201910872696.X | 申请日： | 2019-09-16 |
| 公开（公告）号： | CN110541045A | 公开（公告）日： | 2019-12-06 |
| 发明（设计）人： | 季静;张思琪;王罡;张松皓 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6806;C12N15/11 |
| 代理公司： | 12201 天津市北洋有限责任专利代理事务所 | 代理人： | 曹玉平<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 300072*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用玉米种子快速检测分子特征和品种纯度的方法，步骤为：(1)玉米种子PCR模板的制备：将玉米种子放水浸泡，取1粒加NaOH溶液，NaOH溶液的溶剂为含有EDTA的水，研碎，加热，冷却至室温，加入Tris‑HCl，涡旋混匀，室温下离心，取上清加入(NH4)2SO4水溶液，于‑20℃存放，即为玉米种子PCR模板；(2)PCR扩增，得到扩增产物；(3)产物检测：将扩增产物电泳分析，得到检测结果。本发明的方法利于储存，稳定性高；实用性强，PCR结果没有明显的差异。所需材料较少、成本较低、操作较简便快捷，能在短时间内处理大量的样本，能对大量玉米样品进行分子特征和品种的种子纯度检测。 | ||
| 搜索关键词： | 玉米种子 分子特征 扩增产物 种子纯度检测 产物检测 电泳分析 检测结果 快速检测 品种纯度 玉米样品 溶剂 放水 混匀 涡旋 研碎 制备 加热 浸泡 冷却 样本 储存 | ||
【主权项】：
1.一种利用玉米种子快速检测分子特征和品种纯度的方法，其特性在于包括如下步骤：/n(1)玉米种子PCR模板的制备：将玉米种子放于水中，浸泡2-48h，取1粒浸泡后的玉米种子，放入Eppendorf管中，加入100-400μL 0.1-0.4mol/LNaOH溶液，所述NaOH溶液的溶剂为含有终浓度0.5-1.5mmol/L EDTA的水，研碎玉米种子，在65-100℃水中间接加热1-30min，冷却至室温，加入50-150μL 1mol/L、pH＝8.0的Tris-HCl，涡旋混匀，室温下离心，取上清加入100μL，10-30mmol/L(NH4)2SO4水溶液，于-20℃存放0.5-48h，即为玉米种子PCR模板；/n(2)PCR扩增：将步骤(1)得到的玉米种子PCR模板进行PCR扩增，得到扩增产物；/n(3)产物检测：将步骤(2)所得的产物进行电泳分析，得到检测结果。/n
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