[发明专利]一种基于酶催化循环及二硫化钼吸附介导可视化检测核酸的方法有效

专利信息
申请号: 201910882957.6 申请日: 2019-09-18
公开(公告)号: CN110592191B 公开(公告)日: 2022-11-25
发明(设计)人: 汪联辉;朱煜;朱丹;赵东霞;晁洁 申请(专利权)人: 南京邮电大学
主分类号: C12Q1/6834 分类号: C12Q1/6834
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 孙斌
地址: 210023 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开一种基于酶催化循环及二硫化钼介导吸附可视化检测核酸的方法,包括:将巯基或polyA修饰的捕获序列组装在金纳米粒子表面,构建纳米金捕获探针;向含有目标核酸的待测体系中加入捕获探针,目标核酸与捕获探针完成杂交后进行循环剪切反应;向完成剪切反应体系中加入二硫化钼纳米片,静置反应;取步骤反应后体系的上清液,肉眼观察上清液颜色的变化,并通过紫外分光光度计测量上清液的吸光值变化。本发明基于目标核酸触发的酶循环反应,利用二硫化钼与纳米金探针的吸附进行信号输出,通过裸眼观察或比色光谱即可实现对目标核酸的现场原位快速检测;本发明操作简单、反应条件温和、灵敏度高,选择性好,具有广阔的应用前景。
搜索关键词: 一种 基于 催化 循环 二硫化钼 吸附 可视化 检测 核酸 方法
【主权项】:
1.一种基于酶催化循环及二硫化钼介导吸附可视化检测核酸的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n(1)将巯基或polyA修饰的捕获序列组装在金纳米粒子表面,构建纳米金捕获探针;/n(2)向含有目标核酸的待测体系中加入捕获探针,目标核酸与捕获探针完成杂交后向体系添加含有核酸外切酶III的反应液,进行循环剪切反应;/n(3)向步骤(2)完成剪切反应后的体系中加入二硫化钼纳米片,静置反应;/n(4)取步骤(3)反应后体系的上清液,肉眼观察上清液颜色的变化,并通过紫外分光光度计测量上清液的吸光值变化。/n
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