[发明专利]CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用有效
申请号: | 201910890978.2 | 申请日: | 2019-09-20 |
公开(公告)号: | CN112538497B | 公开(公告)日: | 2023-02-28 |
发明(设计)人: | 牛冬;汪滔;王德华;王磊;程锐;曾为俊;马翔 | 申请(专利权)人: | 南京启真基因工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/90;C12N9/22;C12N5/10;C12N15/113 |
代理公司: | 杭州合信专利代理事务所(普通合伙) 33337 | 代理人: | 沈自军 |
地址: | 211306 江苏省南*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和αβ地中海贫血模型猪细胞系中的应用,针对猪HBA和HBB基因各设计了一对靶点序列,利用该两对靶点序列构建了三种CRISPR/Cas9系统,每种CRISPR/Cas9系统均包括gRNA载体和Cas9表达载体;将该三种CRISPR/Cas9系统中的表达载体按比例分别转入猪成纤维细胞,筛选得到α、β和αβ地中海贫血模型猪细胞系。本发明通过基因编辑技术在猪原代成纤维细胞中对猪HBA、HBB基因分别造成单基因突变及联合基因突变,得到HBA、HBB、HBAHBB基因突变细胞。 | ||
搜索关键词: | crispr cas9 系统 及其 构建 地中海贫血 模型 细胞系 中的 应用 | ||
【主权项】:
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