[发明专利]一种通过叶组培快繁空气凤梨种苗的方法

摘要

本发明公开一种通过叶组培快繁空气凤梨种苗的方法，包括如下步骤：1）空气凤梨叶外植体的采取；2）叶外植体的消毒灭菌；3）叶外植体丛生芽的诱导；4）芽苗的快繁分化培养；5）壮苗生根培养；7）无菌苗的炼苗移栽。本发明材料来源广泛，取材快捷方便，操作简单，繁殖系数高，种苗生长速度快，可在较短时间内快繁大量性状一致、生长一致且健壮的组培苗等优点，既解决了空气凤梨种子繁殖困难，后代有可能发生变异，不能保持母本优良性状的缺点，又解决了很多稀有种或品种只在花后才会产生稀少的子株，不能满足组培快繁全年采集外植体材料的现实问题。

主权项

1.一种通过叶组培快繁空气凤梨种苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n1）空气凤梨叶外植体的采取：要求采取生长良好，母株无任何病虫害的完整幼嫩叶；采集叶时应尽量避免在梅雨季节，或天气至少连续放晴3天，选取母株株心第3-6片幼叶较好，带叶柄最好，作为叶外植体；/n2）叶外植体的消毒灭菌和启动培养：将叶外植体放在洗衣粉中浸泡5-8min，再放入流水中冲洗30-50min，再用1%次氯酸钠+2-3滴吐温配成混合消毒液消毒5-8min，灭菌水冲洗3次后吸干表面水分，拿到超净工作台上，先用70-75%酒精浸泡30s，之后放入0.1%的升汞中消毒8-10min，期间轻轻晃动瓶子，消毒灭菌后无菌水冲洗8-10次，用灭菌吸水纸擦干水分，之后将叶剪成1-2cm带叶柄的长条，平铺接种到启动培养基上，暗培养15-25d得到无菌叶或叶愈伤组织；所述启动培养基为MS+6-BA0.01-0.1mg/L+NAA1-2mg/L+2,4-D1~4mg/L；/n3）叶外植体丛生芽的诱导分化：将步骤2）的无菌叶或叶愈伤组织从启动培养基转接到丛生芽诱导培养基上，在可见光下培养，观察丛生芽生长发育情况；/n4）芽苗的快繁增殖培养：将步骤3）的丛生芽转接到芽苗快繁分化培养基中，在1500-2000LX光下培养；/n5）壮苗生根培养：28-30天后将小芽苗转入壮苗生根培养基长成具有多个茎叶的正常健壮植株；/n6）无菌苗的炼苗移栽。/n