[发明专利]胞内劳森菌的培养方法及应用在审
| 申请号： | 201910918323.1 | 申请日： | 2019-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN110468088A | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 谢书宇;陈冬梅;袁宗辉;罗万和;武梦茹;孟奎宇;潘源虎;瞿玮;程古月;黄玲利;谢长清;王旭;陶燕飞;刘振利 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N5/071;C12R1/01 |
| 代理公司： | 11335 北京汇信合知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张焕响<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种胞内劳森菌的培养方法，包括以下步骤：步骤1：贴壁培养猪肠道细胞；步骤2：待细胞贴壁培养6～8h，将胞内劳森菌与细胞培养液按体积比0.01～1:1接种至细胞中，置于改良的微需氧环境中培养1～96h；步骤3：胰酶消化感染的细胞后，收集感染细胞，并用细胞冻存液重悬感染细胞，转入液氮罐中保存。还公开由所述的培养方法培养的胞内劳森菌的应用，应用于胞内劳森菌分离培养和病原性特征的研究中。本发明应用猪肠道细胞来培养胞内劳森菌，严格模拟宿主体内的体外培养环境，并且应用改良后的微需氧培养箱来培养胞内劳森菌，操作简单，培养周期短，成本低，大大增加培养胞内劳森菌的成功率。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 猪肠道 应用 改良 宿主 收集感染细胞 体外培养环境 细胞贴壁培养 细胞冻存液 细胞培养液 分离培养 感染细胞 培养周期 贴壁培养 需氧环境 胰酶消化 病原性 培养箱 体积比 需氧 液氮 重悬 成功率 接种 并用 体内 转入 保存 感染 研究 | ||
【主权项】：
1.一种胞内劳森菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1：贴壁培养猪肠道细胞；/n步骤2：待所述猪肠道细胞贴壁培养6～8h，将胞内劳森菌与细胞培养液按体积比0.01～1:1接种至细胞中，置于改良的微需氧环境中培养1～96h；/n步骤3：胰酶消化感染步骤2中培养的细胞后，收集感染细胞，并用细胞冻存液重悬感染细胞，转入液氮罐中保存。/n
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