[发明专利]一种高效筛选异丁醇高产菌株的BmoR突变体在审
| 申请号： | 201910921768.5 | 申请日： | 2019-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN110615832A | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 霍毅欣;蔚欢;陈振娅 | 申请（专利权）人： | 北京理工大学 |
| 主分类号： | C07K14/21 | 分类号： | C07K14/21;C12N15/31;C12N15/70 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | BmoR是来源于假单胞菌中的转录因子，其信号分子包括多种高级醇，已经被应作生物传感器筛选正丁醇和异丁醇高产菌株。然而天然转录因子对异丁醇和正丁醇的相应范围只有0‑40mM，这样无法筛选到真正高产的菌株，从而无法满足工业生产的需求。为了解决上述问题，本发明使用蛋白质工程改造的方法改造BmoR。通过随机突变，结构模拟和定点突变的方式，得到了一个性能优异的BmoR组合突变体F276A/E627N。通过底物正丁醇和异丁醇的浓度梯度外源添加实验，验证其对正丁醇和异丁醇的响应范围提高至0‑100mM，并进一步在异丁醇高产菌株中进行了功能验证。本发明通过蛋白质工程的方法对天然转录因子进行了改造，得到性能更加优异的突变体，为转录因子应用于工业生产提供了范例。 | ||
| 搜索关键词： | 异丁醇 转录因子 正丁醇 蛋白质工程 高产菌株 突变体 筛选 生物传感器 改造 定点突变 功能验证 假单胞菌 结构模拟 浓度梯度 随机突变 信号分子 高级醇 底物 丁醇 对正 菌株 外源 验证 响应 应用 | ||
【主权项】：
1.一种能够高效地应用于异丁醇高产菌株筛选的，基于转录因子BmoR突变体F276A/E627N的生物传感器，该方法通过蛋白质工程改造的方法，对天然转录因子进行了随机突变，定点突变和结构模拟，最终筛选到性能优异的BmoR突变体F276A/E627N,相较于野生型BmoR对底物的检测上限提高至100mM(7.4g/L)。/n
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