[发明专利]一种以叶酸修饰壳聚糖为载体的阿霉素纳米微粒的制备方法

摘要

本发明涉及医用材料领域，公开了一种以叶酸修饰壳聚糖为载体的阿霉素纳米微粒的制备方法，本发明先制备得到叶酸活性酯，并通过酰胺反应得到了叶酸修饰壳聚糖；向叶酸修饰壳聚糖溶液中加入配制好的阿霉素溶液和聚多巴胺溶液，得到阿霉素‑叶酸‑壳聚糖；最后将核酸适配子AS1411与阿霉素‑叶酸‑壳聚糖混合，离心，冷冻，干燥，得到以叶酸修饰壳聚糖为载体的阿霉素纳米微粒。发明通过制备一种包埋有抗癌药物的聚合物纳米微粒，可实现高效的肿瘤热疗和靶向为一体的治疗手段，增加药物的稳定性，实现主动靶向性，增加与受体的结合能力，从而大大提升对癌细胞的治疗效果。

主权项

1.一种以叶酸修饰壳聚糖为载体的阿霉素纳米微粒的制备方法，其特征在于，以g和μL、mL计，包括以下步骤：/n1)将阿霉素溶于水中，配得浓度为4-6wt％的阿霉素溶液；将聚多巴胺溶于水中，配得浓度为2-4wt％的聚多巴胺溶液；将溶液预冷，备用；/n2)称取1-1.2g叶酸置于容器中，将其溶解于无水DMSO，然后加入0.67-0.77g EDC和0.4-0.5g NHS，在室温下于暗室搅拌1-3h使叶酸充分溶解；/n3)得到了叶酸活性酯的DMSO溶液，溶液为酒红色；/n4)称取1-1.4g壳聚糖粉末，溶解于1.5-2.5％乙酸溶液中混合均匀，并调节pH＝5.5-6.5，超声后得到壳聚糖溶液；/n5)在暗室中，搅拌条件下将壳聚糖溶液缓慢加入40-60mL含叶酸活性酯的二甲基亚砜溶液，室温下避光反应12-18h；/n6)然后用1mL注射器逐滴加入NaOH溶液(0.1M)，将其pH调至9.0，有黄色沉淀析出；/n7)将步骤6)所得反应中产物装入透析袋分别用磷酸缓冲液和去离子水透析48-60h，冷冻干燥后得到叶酸-壳聚糖粉末；/n8)将所得叶酸-壳聚糖粉末溶于水中配成1.5-2.5mg/mL的叶酸-壳聚糖溶液并调节pH至7-7.5，取3-5mL叶酸-壳聚糖溶液，磁搅拌下将步骤1)所得阿霉素溶液600-700μL滴加到叶酸-壳聚糖溶液中并超声；/n9)将步骤8)所得溶液加入到6-10mL步骤1)所得聚多巴胺溶液中，超声混合均匀；/n10)取1 OD的核酸适配子AS1411溶于5-8mL水中，然后加入8-12mM三(2-羧乙基)膦反应1-2h，再与步骤9)所得产物混合搅拌过夜，最后经离心、洗涤、冷冻干燥处理，制得阿霉素纳米微粒。/n