[发明专利]一种基于G-四链体的鉴别BstUI甲基化敏感位点的方法有效
| 申请号： | 201910938463.5 | 申请日： | 2019-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN110607350B | 公开（公告）日： | 2022-08-16 |
| 发明（设计）人： | 邓惠敏;范子彦;刘珊珊;杨飞;王颖;边照阳;唐纲岭;刘洋 | 申请（专利权）人： | 国家烟草质量监督检验中心 |
| 主分类号： | C12Q1/44 | 分类号： | C12Q1/44;G01N21/64;G01N27/447 |
| 代理公司： | 郑州中民专利代理有限公司 41110 | 代理人： | 姜振东 |
| 地址： | 450001 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于G‑四链体的鉴别BstUI甲基化敏感位点的方法，属于生化分析领域。首先，以含G‑四链体序列、经不同甲基化修饰的Hairpin DNA为底物，加入BstUI，于60℃反应，含BstUI甲基化敏感位点的Hairpin DNA底物不能被识别，从而不能被剪切，而不含BstUI甲基化敏感位点的Hairpin DNA底物能被剪切，释放出G‑四链体片段；最后，向体系中加入N‑甲基卟啉二丙酸IX，与G‑四链体结合产生强荧光信号，可根据荧光信号的强弱鉴别BstUI的甲基化敏感位点。此外，也可通过凝胶电泳对反应后的DNA进行表征以判断甲基化敏感位点。本方法提供了两种灵活的鉴别方式，并鉴别了新的BstUI的甲基化敏感位点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 四链体 鉴别 bstui 甲基化 敏感 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于G-四链体的鉴别BstUI甲基化敏感位点的方法，其特征在于：是以含有G-四链体序列、经不同甲基化修饰的Hairpin DNA为底物，加入对甲基化敏感的限制性内切酶BstUI，于60℃条件下进行剪切反应，剪切反应完毕后，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或荧光测定两种方式鉴别BstUI甲基化敏感位点。/n
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