[发明专利]乳腺特异性表达PEDV单链抗体基因的同源重组载体及应用在审
| 申请号： | 201910953813.5 | 申请日： | 2019-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN110684799A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 李秋艳;林如涛;李志远;郝海阳;史文姝;黄彤彤;牛建芹;李梦然 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/90 |
| 代理公司： | 11002 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人： | 黄爽 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种乳腺特异性表达PEDV单链抗体基因的同源重组载体及应用。所述同源重组载体是以真核表达载体为骨架载体，同源重组载体中至少包括正筛选元件、负筛选标记基因、PEDV单链抗体基因表达盒以及rosa26基因的同源左臂和同源右臂；其中，正筛选元件包括顺次连接的重组酶识别序列‑正筛选标记基因‑重组酶基因‑重组酶识别序列。利用所述同源重组载体转染哺乳动物体细胞，获得的阳性细胞rosa26基因第一个内含子定点整合PEDV单链抗体基因。利用本发明方法成功获得了乳腺特异性表达PEDV单链抗体的转基因猪细胞系，为通过转基因技术制备抗腹泻转基因猪奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 同源重组载体 单链抗体基因 乳腺特异性表达 重组酶识别序列 转基因猪 哺乳动物体细胞 正筛选标记基因 筛选标记基因 真核表达载体 筛选 重组酶基因 转基因技术 单链抗体 定点整合 骨架载体 顺次连接 阳性细胞 基因 表达盒 内含子 右臂 转染 左臂 同源 制备 腹泻 应用 成功 | ||
【主权项】：
1.乳腺特异性表达PEDV单链抗体基因的同源重组载体，其特征在于，所述同源重组载体是以真核表达载体为骨架载体，所述同源重组载体中至少包括正筛选元件、负筛选标记基因、PEDV单链抗体基因表达盒以及rosa26基因的同源左臂和同源右臂；/n其中，所述正筛选元件包括顺次连接的重组酶识别序列-正筛选标记基因-重组酶基因-重组酶识别序列；/n所述正筛选元件的一端与所述同源左臂连接，另一端与所述PEDV单链抗体基因表达盒连接；所述PEDV单链抗体基因表达盒的另一端与所述同源右臂连接，同源右臂的外侧连接有负筛选标记基因。/n
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