[发明专利]低起始量血浆游离DNA甲基化建库试剂盒及方法在审
| 申请号： | 201910963720.0 | 申请日： | 2019-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN110669824A | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 夏渝东;郑子鹏;沈俊芳 | 申请（专利权）人： | 广州迈森致远基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 51247 成都坤伦厚朴专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘丽菲 |
| 地址： | 510000 广东省广州市高新技术产业开发区科学大道231号、*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酶法甲基化建库方法，该方法通过TET酶甲基化处理，一定程度地降低甲基化建库过程中DNA的损伤，从而降低核酸样品中DNA的投入量要求；此外，进一步配合本发明的末端修复和加A反应一步试剂，能够实现一管建库，减少纯化步骤；进一步配合本发明的DNA连接酶增强液，能够提高连接效率，提高建库质量和测序质量；并且本发明方法建库起始量低，DNA投入量可低至1ng，适于包括cfDNA在内的微量建库。 | ||
| 搜索关键词： | 建库 甲基化 投入量 核酸样品 连接效率 末端修复 起始量 增强液 测序 酶法 配合 损伤 | ||
【主权项】：
1.一种甲基化建库方法，包括步骤：/n(1)对核酸样品同时进行末端修复和加A反应；/n(2)将步骤(1)产物进行甲基化接头连接；/n(3)将步骤(2)产物进行酶法甲基化处理，所述酶法甲基化处理步骤依次为TET酶处理、终止TET酶反应、DNA变性处理、胞嘧啶脱氨酶处理；/n(4)将步骤(3)产物进行PCR扩增。/n
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