[发明专利]脐带华通氏胶间充质干细胞成骨定向分化的方法有效
| 申请号： | 201910967171.4 | 申请日： | 2019-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN110564678B | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 刘小翠;赵蓝;李静静;江嘉豪;孙灿兴;褚一凡;梁广荣 | 申请（专利权）人： | 广东唯泰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 许英伟 |
| 地址： | 528200 广东省佛山市南海*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种脐带华通氏胶间充质干细胞成骨定向分化的方法，涉及干细胞与再生医学领域。该方法，包括组织消化、初代培养、传代培养和诱导培养等步骤；组织消化步骤中采用组织消化液进行组织消化，所述组织消化液中包括胶原酶I、DNA酶和Tryple；诱导培养步骤中采用成骨细胞分化诱导培养基进行诱导培养，成骨细胞分化诱导培养基包括α‑MEM基底液、血清替代物、地塞米松、β‑磷酸甘油、抗生素、细胞因子IL‑β、抗坏血酸和异黄酮。本发明的方法可以显著提高脐带间充质干细胞成骨细胞诱导分化效率。 | ||
| 搜索关键词： | 脐带 华通氏胶间充质 干细胞 定向 分化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种脐带华通氏胶间充质干细胞成骨定向分化的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n组织消化：向脐带华通氏胶组织碎块中加入组织消化液进行消化，消化后离心，获得脐带间充质干细胞悬液；所述组织消化液中包括胶原酶I、DNA酶和Tryple；/n初代培养：向脐带间充质干细胞悬液中加入含有双抗的完全培养基，培养；/n传代培养：初代培养后，去除培养液，清洗细胞，加入包括胰蛋白酶和EDTA的消化液进行消化，加入完全培养液终止消化，进行传代培养；/n诱导培养：取传代细胞，消化，终止消化，离心，去掉上清液，保留沉淀，向沉淀中加入完全培养基重悬，接种细胞悬液，培养至预定时间，更换为成骨细胞分化诱导培养基；所述成骨细胞分化诱导培养基包括α-MEM基底液、血清替代物、地塞米松、β-磷酸甘油、抗生素、细胞因子IL-β、抗坏血酸和异黄酮。/n
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