[发明专利]一种烟草降烟碱合成调控基因NtERF91的克隆和应用在审
申请号: | 201911005068.8 | 申请日: | 2019-10-22 |
公开(公告)号: | CN110643616A | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 隋学艺;王丙武;宋中邦;高玉龙;李文正;李梅云;赵璐;袁诚;张洪博;师君丽;李永平;孔光辉;曾建敏;邹聪明;刘勇;黄昌军;吴兴富 | 申请(专利权)人: | 云南省烟草农业科学研究院 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
代理公司: | 53115 昆明今威专利商标代理有限公司 | 代理人: | 欧阳桥 |
地址: | 650000 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了烟草降烟碱合成调控基因NtERF91及其克隆方法与应用,降烟碱合成调控基因NtERF91核苷酸序列如SEQ ID:No.1所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID:No.2所示。本发明还公开了降烟碱合成调控基因NtERF91的克隆方法,具体步骤包括:A、确定NtERF91基因序列;B、提取烟草RNA,反转录得到第一链cDNA;C、根据NtERF91基因序列设计合成特异性引物,以cDNA作为模板,进行PCR扩增;D、回收和纯化PCR产物;E、构建了含NtERF91基因的过表达载体。将过表达载体通过农杆菌介导的转化在烟草中过表达,制备转基因植株。结果显示,转基因植株的上部、中部、下部烟叶中降烟碱含量分别相比对照增加了2.4倍、1.6倍和1.8倍,说明烟草NtERF91基因在培育高降烟碱含量的烟草方面具有较大的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 降烟碱 烟草 合成调控基因 表达载体 基因序列 克隆 氨基酸序列 第一链cDNA 核苷酸序列 农杆菌介导 特异性引物 制备转基因 转基因植株 设计合成 基因 植株 反转录 构建 烟叶 应用 回收 培育 转化 | ||
【主权项】:
1.一种烟草降烟碱合成调控基因NtERF91,其特征在于所述的烟草降烟碱合成调控基因NtERF91的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。/n
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