[发明专利]β-葡萄糖苷酶固定化酶的制备方法在审
| 申请号： | 201911007468.2 | 申请日： | 2019-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN110656102A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 史楠;王海宾;严文霞;王芳;高莉;李紫玉;郭建峰;杨沛阳 | 申请（专利权）人： | 中北大学 |
| 主分类号： | C12N11/08 | 分类号： | C12N11/08 |
| 代理公司： | 61254 西安中科汇知识产权代理有限公司 | 代理人： | 刘玲玲 |
| 地址： | 030051*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶固定化酶的制备方法，包括以下步骤：将预处理好的大孔树脂置于容器中，向容器中加入PBS缓冲液，平衡后再加入β‑葡萄糖苷酶原溶液，然后将容器置于恒温振荡培养箱中振荡吸附，吸附结束后，将大孔树脂与剩余液体分离，用PBS缓冲液将分离后的大孔树脂冲洗至冲洗液中检测不到蛋白，然后再加入PBS缓冲液和戊二醛试剂进行交联，交联结束后，用PBS缓冲液清洗大孔树脂数次，减压干燥后即得β‑葡萄糖苷酶固定化酶。本发明的有益之处在于：该制备方法不仅工艺简单、成本低廉，而且制备得到的β‑葡萄糖苷酶固定化酶在使用过程中稳定性好、催化效率高、可重复和连续利用。 | ||
| 搜索关键词： | 大孔树脂 葡萄糖苷酶 固定化酶 制备 交联 恒温振荡培养箱 催化效率 葡萄糖苷 剩余液体 预处理好 振荡吸附 冲洗液 可重复 戊二醛 酶原 吸附 冲洗 清洗 蛋白 检测 平衡 | ||
【主权项】：
1.一种β-葡萄糖苷酶固定化酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nStep1：将预处理好的大孔树脂置于容器中，向容器中加入PBS缓冲液，平衡后再加入β-葡萄糖苷酶原溶液，然后将容器置于恒温振荡培养箱中振荡吸附；/nStep2：吸附结束后，将大孔树脂与剩余液体分离，用PBS缓冲液将分离后的大孔树脂冲洗至冲洗液中检测不到蛋白，然后再加入PBS缓冲液和戊二醛试剂进行交联；/nStep3：交联结束后，用PBS缓冲液清洗大孔树脂数次，减压干燥后即得β-葡萄糖苷酶固定化酶，将β-葡萄糖苷酶固定化酶于4℃贮存备用。/n
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