[发明专利]基于高阶G4和乙酰基抗体的电化学传感器制备方法及应用有效
| 申请号： | 201911010543.0 | 申请日： | 2019-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN110763742B | 公开（公告）日： | 2022-07-26 |
| 发明（设计）人： | 胡宇芳;张青青;胡丹丹;詹甜玉;王邃;郭智勇 | 申请（专利权）人： | 宁波大学 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327;G01N33/573 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 315211 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种基于高阶G4和乙酰基抗体检测乙酰转移酶活性的电化学传感器制备及应用，具体步骤如下：金电极预处理，底物肽溶液涂覆Au电极。将底物肽修饰电极置于HAT p300反应混合物中孵育，滴加DNA探针‑乙酰化抗体混合液，加入TdT反应混合液使DNA延长生成随机排布的富G的DNA长链，利用钾离子使其形成N个随机G4结构，然后再加入大量DNAG链使其在镁离子的状态下叠加到随机G4结构上形成高阶G4。然后滴加hemin，使高阶G4具有辣根过氧化物酶活性，通过TMB+H |
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| 搜索关键词： | 基于 g4 乙酰 抗体 电化学传感器 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于高阶G4和乙酰基抗体检测乙酰转移酶活性的电化学传感器制备及应用，其特征在于，机理如下：首先将含巯基的底物多肽修饰至金电极表面，当乙酰化反应发生之后，乙酰辅酶A在乙酰转移酶的作用下将乙酰基转移到底物多肽的特定赖氨酸残基上，得到乙酰化的多肽，利用乙酰基和乙酰基抗体的特异性结合作用，将乙酰基抗体-DNA探针的复合物固化到电极表面，再利用TdT延长扩增作用使得DNA探针形成富G DNA长链，在钾离子存在时随机形成N个G-四联体，随后引入一条含有多个G碱基的DNA G链，在镁离子存在下DNAG链会快速形成G-四联体，并有序堆叠到TdT延伸的G-四联体上，这些G-四联体结构通过与hemin的结合，可以形成具有类辣根过氧化物酶催化性能的DNA酶。过氧化氢(H
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