[发明专利]用于双氧水和末端转移酶检测的电化学传感器及应用有效

专利信息
申请号: 201911010590.5 申请日: 2019-10-14
公开(公告)号: CN110646487B 公开(公告)日: 2022-06-14
发明(设计)人: 胡宇芳;张青青;胡丹丹;詹甜玉;王邃;郭智勇 申请(专利权)人: 宁波大学
主分类号: G01N27/327 分类号: G01N27/327;G01N27/48
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 315211 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了基于G4堆叠自组装体的电化学方法及其在双氧水和末端转移酶检测中的应用,具体步骤如下:(1)金电极预处理;(2)Electrode 1:滴加DNA1,常温放置;(3)Electrode 2:在Electrode 1上滴加反应混合液,孵育使DNA1延长生成随机排布的富G的DNA长链。在电极上滴加KCl溶液;(4)Electrode 3:在Electrode 2上滴加混合液【MgCl2+G4链】,常温下放置形成G4堆叠自组装体。滴加hemin,常温下放置使G4与hemin充分作用形成具有辣根过氧化物酶活性的G4‑hemin复合物,即为过氧化氢电化学生物传感器。改变过氧化氢浓度或TdT浓度,探究所制备的一系列传感器对电化学信号的影响。优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快、结果准确可靠、成本低。
搜索关键词: 用于 双氧水 末端 转移酶 检测 电化学传感器 应用
【主权项】:
1.一种基于G4堆叠自组装体的电化学方法及其在双氧水和末端转移酶检测中的应用,其特征在于,机理如下:通过TdT聚合制备随机富含G的DNA序列的简便方法,并证明这种随机富含G的DNA能够形成G-四链体。巯基修饰的DNA探针(DNA1)通过金-硫键组装在金电极上,利用TdT催化dGTP和dATP随机引入DNA末端,然后用钾离子诱导形成游离的G-四链体单体溶液使之在电极上随机形成N个G-四链体结构。在镁离子的存在下的缓冲溶液中,引入新的特定序列G-四链体(DNA2)快速在延伸链上随机堆叠形成G4堆叠自组装体,G4堆叠自组装体通过与hemin的结合,可以形成具有类辣根过氧化物酶催化性能的DNA酶,通过过氧化氢(H
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