[发明专利]一种黄山木兰根系总RNA的提取方法在审
| 申请号： | 201911017197.9 | 申请日： | 2019-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN110643602A | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 杨安娜;贺淑蕊;孙志艳;石亚冉 | 申请（专利权）人： | 安徽师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 34107 芜湖安汇知识产权代理有限公司 | 代理人： | 任晨晨 |
| 地址： | 241000 安徽省*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种黄山木兰根系总RNA的提取方法，将黄山木兰根系组织在液氮中研磨成粉末，与抽提溶剂中混合并孵育得到孵育混合液；进行抽提处理得到抽提上清液；将抽提上清液与氯化锂溶液混合，静置过夜、离心处理得到总RNA沉淀；将总RNA沉淀溶解于SSTE缓冲液中，接着于氯仿/异戊醇混合液中进行抽提处理，得离心上清液；再与无水乙醇混合，‑70℃静置处理，离心处理得到沉淀物；将沉淀物通过乙醇溶液进行清洗得到清洁沉淀物；将清洁沉淀物敞口放置，加DEPC处理的超纯水得到黄山木兰根部总RNA。与现有技术相比，本发明能够成功提取黄山木兰根部总RNA，且纯度优异，提取率高。 | ||
| 搜索关键词： | 抽提 总RNA 总RNA沉淀 离心处理 混合液 上清液 孵育 离心上清液 氯化锂溶液 敞口放置 抽提溶剂 根系组织 静置过夜 无水乙醇 乙醇溶液 清洁 研磨 超纯水 缓冲液 异戊醇 根系 氯仿 液氮 清洗 溶解 成功 | ||
【主权项】：
1.一种黄山木兰根系总RNA的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：/n1)、在液氮中将黄山木兰新鲜侧根研磨成粉末，再将获得的黄山木兰根系粉末与抽提溶剂混合，孵育，得到孵育混合液；/n2)、向步骤1)获得的孵育混合液中加入氯仿-异戊醇混合溶液，抽提离心，得到抽提上清液；/n3)、将步骤2)获得的抽提上清液与氯化锂溶液混合，静置过夜，离心处理，得到总RNA沉淀；/n4)、向步骤3)获得的总RNA沉淀中加入乙醇溶液，漂洗离心，得到沉淀物；/n5)、将步骤4)得到的沉淀物溶解于SSTE缓冲液中，然后与氯仿-异戊醇混合液混合，抽提离心，得离心上清液；/n6)、将步骤5)获得的离心上清液与无水乙醇混合，静置，离心，得到沉淀物；/n7)、将步骤6)获得的沉淀物与乙醇溶液混合，漂洗离心，得到沉淀物，所得沉淀物再加入无水乙醇，漂洗离心，得到沉淀物；即为黄山木兰根系总RNA。/n
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