[发明专利]一种深加工植物油脂中转基因成分提取方法在审
| 申请号： | 201911018346.3 | 申请日： | 2019-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN110656107A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 张理博;鞠福龙;罗淑年;王雪;杨光;夏雷;赵平;刘园园 | 申请（专利权）人： | 九三集团哈尔滨惠康食品有限公司;黑龙江省质量监督检测研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 23206 哈尔滨龙科专利代理有限公司 | 代理人： | 高媛 |
| 地址： | 150000 黑龙江省哈*** | 国省代码： | 黑龙;23 |
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| 摘要： | 一种深加工植物油脂中转基因成分提取方法，属于植物油脂的转基因成分检测技术领域。所述方法步骤如下：向Eppendorf管加入250μL正己烷和250μL DNA裂解液，再加入500μL转基因食用油脂，混合后裂解；加入0.5mL预冷的三氯甲烷和异戊醇的混合液，混合后，冷冻离心，上清液收集到一个Eppendorf管中；重复上述步骤；向装有上清液的Eppendorf管中加预冷的异丙醇，放置沉淀；沉淀后冷冻离心，弃去上清液，再加入乙醇进行洗涤，冷冻离心，弃去上清液，沉淀物烘干，每10min观察一次直至完全晾干；加入TE缓冲液，充分溶解DNA，保存备用。本发明解决了植物油中DNA模板难提取的问题，此操作方法简便，快捷，灵敏度高，可适用于大部分植物油中DNA的提取，提取时间短，且纯度较高。 | ||
| 搜索关键词： | 冷冻离心 上清液 植物油 植物油脂 转基因 预冷 沉淀 转基因成分检测 上清液收集 成分提取 三氯甲烷 食用油脂 晾干 混合液 灵敏度 深加工 异丙醇 异戊醇 正己烷 烘干 乙醇 裂解 洗涤 备用 溶解 保存 重复 观察 | ||
【主权项】：
1.一种深加工植物油脂中转基因成分提取方法，其特征在于：所述方法步骤如下：/n步骤一：准备一支2mL Eppendorf管，加入250μL正己烷和250μLDNA裂解液，再加入500μL转基因食用油脂，充分混合后放入水浴锅中裂解1h；/n步骤二：裂解后向Eppendorf管中加入0.5mL预冷的三氯甲烷和异戊醇的混合液，充分混合后，冷冻离心，将上清液收集到一个新的2mL Eppendorf管中；/n步骤三：重复步骤二一次后执行步骤四；/n步骤四：向装有上清液的2mL Eppendorf管中加预冷的异丙醇，放置沉淀；/n步骤五：沉淀后冷冻离心，弃去上清液，再加入乙醇进行洗涤，冷冻离心，弃去上清液，沉淀物在35℃烘箱中加热1h，如未完全晾干，继续复烘，每10min观察一次直至完全晾干；/n步骤六：晾干后向Eppendorf管中加入TE缓冲液，充分溶解DNA，保存备用。/n
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