[发明专利]一种抗虫低酚棉花品种的育种方法有效
| 申请号： | 201911022582.2 | 申请日： | 2019-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN110628789B | 公开（公告）日： | 2022-01-11 |
| 发明（设计）人： | 米换房;权月伟;唐光雷;翟雷霞;李继军;李文蕾 | 申请（专利权）人： | 邯郸市农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/60 |
| 代理公司： | 石家庄领皓专利代理有限公司 13130 | 代理人： | 张玉婵 |
| 地址： | 056000 *** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明提供一种抗虫低酚棉花品种的育种方法，属于基因工程技术领域，包括对CAD1‑A基因进行克隆，得CAD1‑A‑1质粒；构建CAD1‑A基因的RNAi表达载体；采用根癌农杆菌介导法对所述转Bt基因抗虫棉的胚性愈伤组织进行遗传转化；其中，RNAi表达载体中CAD1‑A基因由α‑球蛋白启动子驱动，α‑球蛋白启动子用Enh Ⅰ增强子进行修饰。该方法能够抑制Bt基因启动子及CAD1‑A基因种子特殊启动子的甲基化，从而抑制复合转基因作物中Bt基因转录水平的显著降低，促进CAD1‑A基因转录水平的降低；能够减少对胚性愈伤组织的毒害，抑制转化细胞的程序化死亡，增加转化频率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗虫低酚 棉花 品种 育种 方法 | ||
【主权项】：
1.一种抗虫低酚棉花品种的育种方法，利用RNAi技术沉默转Bt基因抗虫棉中的杜松烯合成酶基因CAD1-A，制得复合转基因棉花品种，具体步骤包括：/nS1、对所述CAD1-A基因进行克隆，得CAD1-A-1质粒；/nS2、构建CAD1-A基因的RNAi表达载体；/nS3、采用根癌农杆菌介导法对所述转Bt基因抗虫棉的胚性愈伤组织进行遗传转化；/n其中，所述步骤S2中RNAi表达载体中CAD1-A基因由α-球蛋白启动子驱动，所述α-球蛋白启动子用EnhⅠ增强子进行修饰。/n
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