[发明专利]一种确定产氢产乙酸菌最适保存温度的方法

摘要

本发明公开了一种确定产氢产乙酸菌最适保存温度的方法，属于环境工程技术领域。本发明通过流式细胞术对产氢产乙酸菌中活细胞，凋亡早期细胞，凋亡晚期细胞和死细胞比例进行表征，并与产氢产乙酸菌活性恢复过程的特征指标进行关联性分析，建立了基于流式细胞术的确定产氢产乙酸菌最适保存温度的方法。运用此方法，可以省略产氢产乙酸菌活性恢复的步骤，有效帮助准备采用产氢产乙酸菌强化底物转化的高浓度有机废处理工程，并显著提升产氢产乙酸的生产效率，其中产氢气和乙酸产量均超过18.0％和620mg/L，且能够维持长期稳定运行，具有很高的可行性。

主权项

1.一种确定产氢产乙酸菌的最适保存温度的方法，其特征在于，所述方法是利用流式细胞术测定不同温度保存的产氢产乙酸菌的细胞活性状态，将其中细胞活性状态最接近厌氧颗粒污泥中试运行时的细胞活性状态时保存的温度确定为最适保存温度；/n所述利用流式细胞术测定细胞活性状态的方法包括如下步骤：/n(1)产氢产乙酸菌测试样液的制备：用pH为5.0-5.8的缓冲液稀释产氢产乙酸菌样品，并加入半胱氨酸，混合均匀后过滤，取沉淀物；再用pH为5.0-5.8的缓冲液稀释，同时加入半胱氨酸混合均匀；过滤取沉淀物，使用添加了半胱氨酸的pH 5.0-5.8预冷缓冲液吹洗细胞，重复离心和清洗，再取上清液作为样品，使用适量10x Annexin V Binding Buffer混匀制得；/n(2)置于流式细胞仪测定各样液的细胞活性状态。/n