[发明专利]利用分子伴侣构建的吡喃糖氧化酶基因、蛋白、毕赤酵母菌及制备和应用在审
申请号: | 201911033580.3 | 申请日: | 2019-10-28 |
公开(公告)号: | CN110628790A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
发明(设计)人: | 董聪;王玥;高庆华;王庆庆;罗同阳;马清河;马金国 | 申请(专利权)人: | 河北省微生物研究所 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/04;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
代理公司: | 13101 石家庄海天知识产权代理有限公司 | 代理人: | 田文其 |
地址: | 071051 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 本发明属于新基因的制备及工程菌的构建,特别是指一种利用分子伴侣构建的吡喃糖氧化酶基因、蛋白、毕赤酵母菌及制备和应用。本发明是将毕赤酵母中EroⅠ、PDI、CNE1、SEC53等基因分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZ等系列衍生质粒连接,并与P2O共表达转化入Pichia pastoris GS115菌株中,涂布于不同博来霉素浓度梯度YPD平板上考察其效果,通过分子伴侣共表达和发酵条件优化,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达吡喃糖氧化酶的菌株,该菌株表达的吡喃糖氧化酶在10L发酵罐上酶活达405U/mL,比没有分子伴侣共表达菌株酶活提高1倍,为吡喃糖氧化酶规模化生产奠定了良好基础。 | ||
搜索关键词: | 吡喃糖氧化酶 分子伴侣 菌株 毕赤酵母 共表达 构建 酶活 毕赤酵母菌 共表达菌株 规模化生产 制备和应用 表达载体 发酵条件 分泌表达 浓度梯度 筛选鉴定 衍生质粒 等基因 发酵罐 工程菌 新基因 制备 蛋白 克隆 基因 转化 优化 考察 | ||
【主权项】:
1.利用分子伴侣构建的吡喃糖氧化酶基因,其特征在于其基因序列为SEQ ID No.1。/n
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