[发明专利]一种提高细胞抗体表达量的方法有效
| 申请号： | 201911038650.4 | 申请日： | 2019-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN110669791B | 公开（公告）日： | 2020-08-04 |
| 发明（设计）人： | 张志新;卓越;周阿芳 | 申请（专利权）人： | 成都益安博生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/86 | 分类号： | C12N15/86;C12N15/90;C12N15/52 |
| 代理公司： | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人： | 李亚男 |
| 地址： | 610041 四川省成都*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高动物细胞抗体表达量的方法。该方法包括以下步骤：(1)设计gRNA，具体序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；(2)将退火后的gRNA与质粒连接，并对连接后的质粒进行克隆保存；(3)采用步骤(2)所得质粒进行病毒包装，然后再对细胞进行病毒转染，培养5～7天后，筛选得到TRIM21蛋白敲除的单克隆细胞株，最后得到TRIM21蛋白敲除的细胞系。本发明通过敲除细胞内的TRIM21蛋白，可将细胞抗体表达量提高达20％‑50％，并且，在提高抗体表达量的同时不会影响抗体的质量，还能降低抗体的生产成本，缓解抗体市场的供需平衡。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 细胞 抗体 表达 方法 | ||
【主权项】：
1.一种提高细胞抗体表达量的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)设计gRNA，具体序列如下：/ngRNA-F：CACCGCAATCGACAGCTAGCCAACA；/ngRNA-R：AAACTGTTGGCTAGCTGTCGATTGC；/n(2)将退火后的gRNA与质粒连接，并对连接后的质粒进行克隆保存；/n(3)采用步骤(2)所得质粒进行病毒包装，然后再对细胞进行病毒转染，培养5～7天后，筛选得到TRIM21蛋白敲除的单克隆细胞株，最后得到TRIM21蛋白敲除的细胞系。/n
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