[发明专利]一种可实现肿瘤靶向递送核糖核蛋白复合物的纳米粒子的制备方法和应用

摘要

一种可实现肿瘤靶向递送核糖核蛋白复合物的纳米粒子的制备方法和应用，这种纳米粒子由具有肿瘤微环境响应性的聚合物和核糖核蛋白复合物通过自组装形成，具有环境响应性的聚合物允许纳米粒子在血液循环过程中保持稳定，同时增强纳米粒子在肿瘤组织中的富集。我们向患有肿瘤的小鼠注射携带有荧光探针标记的核糖核蛋白复合物的纳米粒子实现了核糖核蛋白复合物在肿瘤组织中的有效富集，表明利用这种纳米粒子完全可以实现肿瘤靶向递送核糖核蛋白复合物的递送。

主权项

1.一种可实现肿瘤靶向递送核糖核蛋白复合物的纳米粒子的制备方法，其特征包括如下步骤：/n1)顺-乌头酸酐修饰的聚乙二醇mPEG-CA的合成，/n首先向容器中加入顺-乌头酸酐并加超干二氯甲烷充分溶解，然后加入草酰氯和二甲基甲酰胺在0℃-4℃下搅拌15-30分钟，恢复至室温继续反应1-3小时，顺-乌头酸酐与草酰氯的用量摩尔比为1:1.5；反应结束后旋转蒸发反应溶剂，继续加入超干二氯甲烷溶解反应产物并加入少量吡啶作为催化剂，随后加入单氨基封端的聚乙二醇在室温下反应3-5个小时；所述顺-乌头酸酐与单氨基封端的聚乙二醇的用量摩尔比为5:1；反应结束后加入等体积的饱和氯化铵终止反应，收集有机相，用冰乙醚沉淀，干燥后得棕色固体产物即为mPEG-CA；/n2)环境响应性聚合物的合成，/n2.1)首先将N-苄氧羰基-L-赖氨酸和三光气加入到容器中，加入超干四氢呋喃搅拌溶解，其中N-苄氧羰基-L-赖氨酸与三光气的用量摩尔比为1:1.5；在60℃-70℃油浴搅拌条件下反应2-4h，待反应澄清之后，用氩气除去容器中的残余三光气；浓缩反应液，快速加入预先准备好的过量正己烷中，放入冰箱过夜沉淀、抽滤，得到淡黄色固体，加入体积比为1:1的乙酸乙酯/正己烷溶液，加热溶解至微沸，趁热过滤去除去不溶物，得到饱和的N-苄氧羰基-L-赖氨酸酐Lys(Z)-NCA溶液，静置析出结晶，冰箱过夜；重复上述重结晶过程，抽滤，得到Lys(Z)-NCA；/n2.2)将步骤2.1)得到的Lys(Z)-NCA溶解在无水DMF中，通过加入正丁胺作为引发剂进行聚合，Lys(Z)-NCA与正丁胺的用量摩尔比为120:1；将反应混合物在30℃-40℃下通入干燥氩气搅拌48-72小时；然后减压蒸发溶剂，将所得产物溶于少量CHCl