[发明专利]一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法

摘要

本发明提供了一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法，属于食品质量安全检测技术领域。所述蔗糖转化酶酶值的检测方法包括以下步骤：(1)蜂蜜样品中酶液的提取；(2)酶液的显色反应；(3)蔗糖转化酶酶值计算。所述检测方法是基于酶液催化蔗糖产生的还原糖溶液和3,5‑二硝基水杨酸溶液共热后，3,5‑二硝基水杨酸能够被还原成棕红色氨基化合物的原理建立的蜂蜜中蔗糖转化酶酶值实现。本发明采用超滤的方法富集了蜂蜜中的酶，并去除了蜂蜜中还原糖的干扰，对反应中显色剂溶液用量，缓冲液pH值，反应温度，反应时间进行了优化，进而建立了一种评价蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法，具有操作简单，准确高效等优点。

主权项

1.一种蜂蜜中蔗糖转化酶酶值的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)将蜂蜜溶解后离心，得到澄清液和沉淀，将所述沉淀复溶，得到复溶液，将所述澄清液进行超滤，得到的浓缩液稀释后再次超滤，得到的再次超滤浓缩液与所述复溶液混合定容，得到酶液；所述溶解、复溶或稀释用溶液为pH值4.0～6.8的缓冲液；/n2)分别量取2mL所述酶液置于两支试管中，试管1为实验组，试管2为对照组，向试管2中加入1mL灭活液进行灭活，将试管1、试管2和蔗糖溶液在30～50℃条件下水浴10min，分别吸取蔗糖溶液2mL加至试管1和试管2中，在30～50℃条件下反应0.5～3.0h，向试管1中加入1mL所述灭活液终止反应；/n3)从试管1和试管2中吸取相同体积的反应液1～3mL分别移置两个具塞比色管后，分别加入显色剂溶液0.25～3.5mL，在沸水浴中反应5min，冷却，用水将各具塞比色管溶液定容至刻度，将得到的两个具塞比色管中溶液于540nm波长下测定吸光度OD值，用定容至所述刻度的不含所述反应液的显色剂溶液做空白调零；/n4)绘制还原糖标准曲线，按照公式(2)计算蔗糖转化酶酶值；/n