[发明专利]一种纸基耦合增强拉曼传感器制备及其在大田软海绵酸检测中的应用

摘要

本发明提供了一种基于适配体特异性虏获性能的纸基耦合增强拉曼（SERS）传感器及其制备方法，并提供其在海洋水体和海产品中大田软海绵酸的高特异性分析。在纸纤维表面还原诱导组装致密、有序的纳米金颗粒，构筑表面等离子体共振纳米金纸SERS基底；原位合成三维空间树突状3D银材料，构建高热点密度电磁场增强的SERS耦合双层，引入互补DNA链建立特异性虏获‑表面耦合增强拉曼分析界面，实现拉曼光谱快速的精确分析，达到现场检测的目的，制备方法简单，成本低廉，可大规模制备，为海水治理提供理论与技术支持。

主权项

1.一种基于适配体特异性虏获性能的纸基耦合增强拉曼传感器制备及其在大田软海绵酸检测中的应用，包括如下步骤：/n（1）利用图形软件Adobe Illustrator CS6绘制各个功能区域，然后，利用固体蜡打印在色谱纸上同时制造50个初步纸芯片模型。对蜡打印图形进行烘烤，使蜡浸透纸背，在色谱纸两面形成疏水区域；/n（2）在步骤（1）得到的纸芯片模型的功能区域内，利用金种子溶液对纸基表面进行纳米金颗粒修饰，经过孵育，纸纤维上原位催化形成结构有序、排列致密、贯通纤维上下的纳米金颗粒，获得纳米金-纸基固相基底，即“热点”一级增强的SERS纸基底；/n（3）将步骤（2）得到的纸芯片模型进行树突状银材料修饰，在芯片模型修饰了纳米金颗粒的区域依次滴加硝酸银溶液和羟胺溶液，原位合成树突状银材料，构筑高热点密度的双重耦合增强的SERS纸基底；/n步骤（3）所述的硝酸银的浓度为40 mmol/L，羟胺的浓度为4.0 mmol/L；/n步骤（3）所述的硝酸银溶液的用量为5 微升，羟胺溶液的用量为5 微升；/n（4）大田软海绵酸的特异性DNA模拟酶链，定义为链1，其碱基序列如核苷酸序列表所示，将一定浓度的链1固定在纸芯片的树突状银/纳米金修饰的功能区域，随后用巯基乙醇封锁活性位点，滴加磷酸盐缓冲溶液清洗；/n（5）将一定浓度的染料修饰的互补DNA适配体链，定义为链2，其碱基序列如核苷酸序列表所示，滴加于链1修饰的功能区域，室温下孵育3 h，用磷酸盐缓冲溶液清洗；/n（6）将一定浓度的大田软海绵酸加入到步骤（5）所得功能区域中，室温下反应2 h，用磷酸盐缓冲溶液洗掉非特异性吸附的大田软海绵酸及解离的链2；/n（7）利用拉曼光谱仪在633 nm激光激发下，绘制拉曼强度对大田软海绵酸浓度的标准曲线，实现海洋水体和海产贝类实际样品中大田软海绵酸浓度检测。/n