[发明专利]高通量测序文库的构建方法以及用于文库构建的试剂盒有效
| 申请号： | 201911122433.3 | 申请日： | 2019-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN110734908B | 公开（公告）日： | 2021-06-08 |
| 发明（设计）人： | 王洋;闫通帅;罗镓超 | 申请（专利权）人： | 福州福瑞医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C40B40/06;C40B50/06;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 黄爽 |
| 地址： | 350011 福建省福州市晋*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供一种高通量测序文库的构建方法以及用于文库构建的试剂盒。所述试剂盒包含如下成分中的至少一种：高通量测序Y型接头，用于单端线性PCR扩增的通用引物，用于单端线性多重PCR扩增的生物素标记特异性引物，正、反向文库扩增引物，UDG酶等。基于该试剂盒构建靶向双分子标签(UMI分子标签和链特异性分子标签)高通量测序文库的方法。本方法在基于多重PCR扩增的靶向测序体系中实现了随机分子标签UMI和序列多态性的链特异性分子标签双重纠错机制的同时，规避了绝大多数常规多重PCR扩增靶向测序体系的弊端，从而摒除了突变检测中的一切假阳性和假阴性，可对样品中的低频核酸突变进行高灵敏度，精准度以及高深度的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 通量 序文 构建 方法 以及 用于 文库 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.高通量测序接头，其特征在于，所述高通量测序接头是由单链AS1和S1按等摩尔比混合退火而成的Y型接头；/n单链AS1的核苷酸序列为：5’/PO4/-CTGCNNNNNNTCACCGACGGATCCGACTATAGTGAGTCGTATTA-3’；/n单链S1的核苷酸序列为：5’-GCTATGACTCGGATCCGTCGGTGAMMMMMMGCAGT-3’；/n其中，/PO4/表示磷酸化修饰；N、M各自独立地选自A、T、G或C；NNNNNN与MMMMMM互补配对。/n
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