[发明专利]抗RET突变体蛋白单克隆抗体可变区序列的制备方法在审

专利信息
申请号: 201911129255.7 申请日: 2019-11-18
公开(公告)号: CN110938145A 公开(公告)日: 2020-03-31
发明(设计)人: 雍金贵;缪连军;张磊 申请(专利权)人: 安徽环球基因科技有限公司
主分类号: C07K16/28 分类号: C07K16/28
代理公司: 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 代理人: 韩立峰
地址: 239001 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明公开了一种抗RET突变体蛋白单克隆抗体可变区序列的制备方法,针对RET蛋白C634位点进行突变,合成多肽序列,分别将多肽与载体蛋白KLH进行偶联并与弗氏佐剂进行乳化,制得乳化抗原,将突变体分别构建表达序列至紫色荧光蛋白mcherry氨基端并与表达载体结合,制得检测原,通过乳化抗原对小鼠进行免疫,将小鼠骨髓瘤SP2/0细胞和免疫小鼠脾细胞进行细胞融合,并用半固体培养基和检测原进行培养,通过观察克隆团形成及培养基颜色变化,将阳性克隆挑选至新6孔板中,并改用液体培养基进行扩大培养,将各细胞株再转移至摇瓶培养,收集培养基上清,进行抗体纯化,对抗体进行测序,获得可变区序列。
搜索关键词: ret 突变体 蛋白 单克隆抗体 可变 序列 制备 方法
【主权项】:
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