[发明专利]一种提高D-阿洛酮糖-3差向异构酶异源表达的方法

摘要

本发明公开了一种提高D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶异源表达的方法，属于生物工程技术领域。本发明中D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的基因来源于根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)。通过密码子优化处理，将优化后的，编码DPE蛋白的基因序列(DPE(O))载入表达质粒pET22b，构建重组基因工程菌BL21(DE3)/pET22b‑DPE(O)。发明进一步优化基因工程菌诱导表达DPE蛋白的具体条件，从而确定了提高D‑阿洛酮糖‑3差向异构酶异源表达的具体方法，最后确定，在pH为8.5～9.0的LB培养基中，接种量为2％，装液量为50％时，BL21(DE3)/pET22b‑DPE(O)菌体培养3～4h后，加入0.3～0.5mM IPTG，30℃，180～200rpm条件下诱导5h，重组DPE蛋白的表达量最高,为2.1g/L。