[发明专利]一种针对多种来源细胞样本中内部核糖体结合位点元件的高通量鉴定方法有效
| 申请号： | 201911160967.5 | 申请日： | 2019-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN110819707B | 公开（公告）日： | 2023-07-18 |
| 发明（设计）人： | 尹继业;王蕾云;郭成贤 | 申请（专利权）人： | 中南大学湘雅医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12Q1/6897;C12N15/867;C12N15/65 |
| 代理公司： | 长沙优企知识产权代理事务所(普通合伙) 43243 | 代理人： | 刘佳芳;周栋 |
| 地址： | 410008 湖南省*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种针对多种来源细胞样本中内部核糖体结合位点（IRES）元件的高通量鉴定方法。利用针对mRNA链5’‑端帽子结构及3’‑端多聚腺苷酸尾巴设计的寡聚核苷酸通过逆转录从样本中获取全长的cDNA文库，利用TN5转座酶及所设计含特殊接头序列的核酸片段使cDNA文库片段化，利用含有红色荧光蛋白及绿色荧光蛋白及特殊元件的慢病毒报告基因质粒载体来筛选具有活性的IRES元件并排除翻译过程中造成的假阳性结果，利用长读长测序技术对活性IRES元件进行鉴定并排除转录过程中启动子及可变剪切造成的假阳性结果。所述方法将IRES元件的高通量鉴定推向临床应用，从而可对疾病发生发展过程中IRES元件所扮演的角色进行深入研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 针对 多种 来源 细胞 样本 内部 核糖体 结合 元件 通量 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
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