[发明专利]一种南非2型口蹄疫病毒VP1基因的可溶性表达方法在审
| 申请号： | 201911166768.5 | 申请日： | 2019-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN110862437A | 公开（公告）日： | 2020-03-06 |
| 发明（设计）人： | 丁耀忠;汪洋;李国秀;马维民;何继军;李茜;爱斯纳非.科友斯.伍赛特;代军飞;张杰;侯谦;马炳;李小云;刘永生;孙跃峰;吕建亮;邵军军;王永录;张忠旺;张永光 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C07K14/09 | 分类号： | C07K14/09;C07K1/22;C12N15/42;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人： | 贾慧娜 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种南非2型口蹄疫病毒VP1基因的可溶性表达方法，以南非2型口蹄疫病毒基因组(JX014256)为参考序列，在FMDV SAT2的VP1蛋白编码基因上游直接偶联SUMO促溶表达标签编码基因，然后在SUMO的上游引入6个His标签编码基因，再根据大肠杆菌密码子嗜性，优化HisSUMO‑SAT2‑VP1基因，重组至PUC57质粒，以HisSUMO‑SAT2‑VP1‑PUC57质粒为模板，设计特异性引物；PCR扩增后利用相同的限制性内切酶酶切目的片段与表达载体，将目的基因克隆入pET32a(+)原核表达载体，构建重组质粒pET32a‑HisSUMO‑VP1，转入大肠杆菌诱导表达，利用镍柱进行纯化。结果表明HisSUMO‑VP1蛋白在大肠杆菌中能可溶性表达，纯化后的目的蛋白具有较好的免疫原性。本发明充分利用His与SUMO标签的优点，不仅提高Ni与组氨酸结合的特异性和稳定性，而且提高重组蛋白纯化效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 南非 口蹄疫病毒 vp1 基因 可溶性 表达 方法 | ||
【主权项】：
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